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[摘要] 目的 探讨二至百合浓缩膏对去势雌性大鼠（双侧卵巢切除术）焦虑行为学的影响。 方法 3～4月龄Wistar雌性大鼠随机分成5组，假手术对照组，模型组，二至百合高、中、低剂量组。除假手术组，其余用手术摘除双侧卵巢建立去势更年期大鼠模型，给药组分别给予二至百合浓缩膏水溶液（1.92、0.96、0.48 g/kg），假手术空白对照组和模型对照组给予相应容量的蒸馏水，连续45 d。采用高架十字迷宫和明暗箱实验，观察实验大鼠行为学的变化。 结果 二至百合高剂量组可显著减低模型大鼠高架十字迷宫实验中OT%，与模型组比较差异有统计学意义（P<0.05）。二至百合高、中剂量组亦可显著升高大鼠明箱停留时间和穿箱次数，与模型组比较差异有统计学意义（均P<0.05）。 结论 二至百合浓缩膏具有较好的改善去势雌性模型大鼠焦虑症状的作用。
[关键词] 二至百合浓缩膏；抗焦虑；雌性大鼠；去势；高架十字迷宫；明暗箱
[中图分类号] R363 [文献标识码] A [文章编号] 2095-0616（2013）12-20-03
更年期综合征是妇女在这一时期由于雌激素水平下降所致的以机体内分泌失调、植物神经系统功能紊乱为主，伴有神经心理症状的一组症候群。二至百合组方中包含女贞子、旱莲草、百合、知母、牡蛎等中药组成成分，具有滋阴潜阳，退热安神之功效。主要用于妇女更年期初期，证见阴虚阳亢，阴虚发热，骨蒸潮热，焦虑烦躁，失眠多梦者。本实验通过雌性大鼠双侧卵巢祛除术复制大鼠更年期综合征模型，观察二至百合方对模型大鼠焦虑行为学指标的影响，初步评价药物的改善更年期焦虑作用。
1 资料与方法
1.1 药品及试剂
二至百合浓缩膏，北京中研同仁堂医药研发有限公司（批号20120902）。
1.2 实验动物
Wistar大鼠，75只，雌性，体重（200±20）g，SPF级，购自中国人民解放军军事科学院实验动物中心。许可证编号：SCXK-（军）2007-004。
1.3 仪器
海尔BCD-257SL冷藏冷冻冰箱：青岛海尔股份有限公司；Sartorious BT 124S电子精密天平：赛多利斯科学仪器（北京）有限公司；明暗穿梭箱、高架十字迷宫、高架十字迷宫实验视频分析系统、SLY-ETS小动物行为活动记录分析系统，均由北京硕林苑科技有限公司生产。
1.4 方法
1.4.1 动物模型制备与分组 在适应性饲养5 d后，将75只大鼠随机分为5组，分别为：假手术空白组，模型组，二至百合高剂量（1.92 g浓缩膏/kg）、中剂量（0.96 g浓缩膏/kg）、低剂量（0.48 g浓缩膏/kg）组，每组15只。
模型组及受试样品3个剂量组制备雌性去势大鼠（双侧卵巢切除术）模型[1-2]：大鼠0.1%戊巴比妥钠0.5 mL/100 g体重（50 mg/kg）腹腔注射麻醉。麻醉大鼠取俯卧位，在背部中1/3处剪毛、备皮，碘伏常规消毒。自腰椎沿背部正中线向下做纵行切口约2～3 cm，切开皮肤，沿肩胛线分别于左右两肋下剪开腰肌，暴露出卵巢及紧密相连的子宫，在子宫角上做两个结扎，结扎后切断，将卵巢摘除，缝合皮肤。术后连续腹腔注射72万U/kg青霉素，以防感染，1次/d，连续3 d。术后第3天开始给大鼠阴道涂片观察，连续5 d，每天1次，以确定卵巢完全切除。实验动物从术后的第5天起全部进入动情间期，但动物不再出现动情前期，动情期的雌激素变化，动物基本上符合“更年期”表现。假手术空白组大鼠除不行卵巢摘除外，其余步骤同模型组。
造模后9 d，除假手术空白组和模型组给予等体积蒸馏水外，其余各组开始灌胃给药，每日1次，连续45 d后分别进行高架十字迷宫和明暗箱行为学实验测试（先开展高架十字迷宫实验，其后间隔1周后开展明暗箱实验）。
1.4.2 大鼠高架十字迷宫实验 末次给药30 min后，进行高架十字迷宫行为学的测评。实验开始时，将大鼠放入高架十字迷宫中央，头朝开臂，观察5 min内大鼠的活动情况[3-5]。观察并记录以下各项指标：进入开臂次数，进入闭臂次数，以及在两臂的滞留时间。分别计算大鼠进入开臂的时间占总时间（开臂和闭臂滞留的时间之和）的百分比（open arm time percent，OT%），以及大鼠进入开臂的次数占总次数（开臂与闭臂之和）的百分比（open arm entry percent，OE%）。观察时以大鼠四爪均进入开臂或闭臂为准。
1.4.3 大鼠明暗箱实验 末次给药30 min后，将大鼠置于明箱中央，背朝通道，观察5 min内大鼠的活动情况并记录明暗箱停留时间和穿箱次数。
以上两种行为学检测实验操作时，应保持外界环境安静，每次放入大鼠前清理干净箱内的排泄物，尽可能保证每批次检测的客观性。
1.5 统计学处理
采用SPSS13.0统计软件进行统计处理，数据以（）表示，数据先进行方差齐性检验。方差齐选用One-Way ANOVA法进行各组间比较；方差不齐选用t检验进行组间比较。
2 结果
2.1 二至百合浓缩膏对去势大鼠高架十字迷宫行为活动的影响
实验结果显示，模型组组大鼠与假手术空白组比较，OE%和OT%显著减小（均P<0.01），表现出明显的焦虑症状。二至百合高剂量组可显著减低模型大鼠OT%，与模型组组比较差异有统计学意义（P<0.05）。表明受试品具有较好的改善去势雌性模型大鼠高架十字迷宫焦虑症状的作用。见表1。
2.2 二至百合浓缩膏对去势大鼠明暗箱穿梭行为的影响
研究结果显示，模型组大鼠明箱停留时间和穿箱次数均显著降低，与假手术空白组比较差异有统计学意义（分别P<0.001， P<0.05），表明模型组大鼠去势后，产生了明显的焦虑行为改变。与模型组比较，二至百合高剂量组可显著升高大鼠明箱停留时间和穿箱次数（分别P<0.001，P<0.01），中剂量组可显著升高大鼠明箱停留时间和穿箱次数（均P<0.05）。见表2。 3 讨论
更年期综合征[6]属于中医学“绝经前后诸症”范畴，历代文献关于本病的论述散见于“脏躁”“心悸”“失眠”“眩晕”“头痛”“郁证”等病症中。绝经前后肾脏虚损，肾气渐衰，阴精耗伤，阴阳平衡失调，脏腑功能紊乱而出现绝经前后诸症证候[7]。随着我国人口结构不断老龄化和社会竞争日益激烈，不良的工作环境、家庭关系紧张及精神等因素影响，妇女进入更年期逐渐增加、年龄提早，从而使更年期焦虑症的发病率亦明显增加[8]。因此治疗和缓解更年期综合征焦虑症具有重要的社会意义。
二至百合方由经典方剂“二至丸”和“百合知母汤”合方加减而成，具有滋阴潜阳，退热安神之功效。本研究主要通过雌性大鼠卵巢祛除术复制大鼠更年期综合征模型，进而采用高架十字迷宫和明暗箱实验观察二至百合方对模型大鼠焦虑行为学的影响，评价处方的改善更年期综合征焦虑作用。
高架十字迷宫模型，为抗焦虑研究中公认的非条件反射模型，是抗焦虑研究中应用最广泛的模型之一[9]。它利用动物对新异环境的探究特性相对高悬敞开臂的恐惧心理，形成动物的矛盾行为，进入开放臂的百分数（OE%）和在开放臂停留时间的百分数（OT%）反映的是动物趋近规避冲突的结果，与焦虑程度直接相关。通常抗焦虑药只增加动物对开放臂的探索，使OE%和OT%上升。开放臂和封闭臂总进入次数反映了动物总的运动能力，可用来观察药物有无镇静作用及镇静强度。被保护区的活动性一定程度上与抗焦虑剂的效应相关[10]焦虑动物的OE%和OT%明显降低，经典抗焦虑药物则使两者升高[11]；明暗箱行为实验[12-13]中，明箱活动时间越长，探洞和穿梭次数越多，反映实验动物对新环境的探索欲望水平越高，探索欲越强则代表环境适应能力越强，焦虑水平越低。
本实验以去势大鼠造成更年期模型，考虑动物行为检测的个体差异可能比较大，所以本实验选用了较为经典的2种焦虑行为检测方法进行二至百合胶囊的抗焦虑实验。本研究表明，高架十字迷宫实验中，与假手术空白组比较，去势大鼠进入开闭时间和次数的百分率显著下降，在明暗箱实验中，与假手术空白对照组比较，去势大鼠在明箱停留时间明显缩短，穿箱次数明显减少。由此提示，去势动物处于焦虑状态。高架十字迷宫实验中，二至百合浓缩膏3个剂量组均可增加去势大鼠OE%和OT%值，与模型组比较，中剂量组OE%和OT%值有明显的统计学意义（P<0.05），高剂量组的OT%值与模型组比较差异具有统计学意义（P<0.05）。低剂量组的OE%和OT%值与模型组比较有增加，但无显著性差异。实验结果表明二至百合浓缩膏有一定的抗焦虑作用。明暗箱实验中，二至百合浓缩膏高、中剂量组大鼠的明箱停留时间和穿箱次数与模型组大鼠相比均显著增加（P<0.05或P<0.01）。两个实验结果表明，二至百合浓缩膏在大鼠高架十字迷宫和明暗箱行为学测试中均表现出较好的抗焦虑作用，表明受试品具有较好的改善去势雌性模型大鼠焦虑症状的效应。
根据相关文献报道含有百合[14-15]、知母[16-17]等药物组方在临床上对更年期综合征具有明显治疗作用，有实验表明含有女贞子[18]的复方药物连续灌胃可明显降低更年期大鼠血清促性腺激素FSH含量，对血清E2含量有显著增加作用，使更年期阴虚内热、烦躁不安、失眠等症状得以缓解。
本实验研究结果表明二至百合方对更年期焦虑症状有明显改善，对更年期综合征有一定的缓解作用，但是二至百合方改善更年期综合征模型大鼠焦虑行为学的作用机理有待进一步深入研究。
[参考文献]
[1] 徐叔云.药理实验方法学[M].第2版.北京：人民卫生出版社，199：1293
[2] 董丽，程卫东，李建，等.玫参胶囊对雌性去卵巢大鼠性激素与下丘脑神经递质调节作用的实验研究[J].陕西中医，2009，30（3）：356-357.
[3] 王欣，谢鸣.酸枣仁汤对高架十字迷宫大鼠行为学影响的量效关系评价[J].中国实验方剂学杂志，2004，10（1）：35.
[4] Pellow S，Chopin P，File SE，et al.Validation ofopen：closed arm entries in an elevated plus-maze as ameasureof anxiety in the rat[J].J Neurosci Methods，1985，14（3）：149-167.
[5] Bertoglio LJ，Carobrez AP.Previousmaze experience required to increase open arms avoidance in rats submitted to the elevated plus-maze model of anxiety[J].Behav Brain Res，2000，108（2）：197-203.
[6] 乐杰，谢幸，丰有吉.妇产科学[M].北京：人民卫生出版社，2004：349-352.
[7] 马宝璋，刘瑞芬，杜慧兰.中医妇科学[M].上海：上海科学技术出版社，2007：118-120.
[8] 秦莉花，李晟，易霞，等.中医药治疗更年期焦虑症的思考[J].中国现代医药杂志，2012，14（11）：128-130.
[9] Gard PR，Haigh SJ，Cambursano PT，et al.Strain differences in anxiolytic effects of losartan in the mouse[J].Pharmacol Biochem Behav，2001，69：35-40.
[10] Cole JC，Rodgers RJ.An ethological analysis of the effects of chlordiazepoxide and bretazenil（Ro16-6028） in themurine ele-vated plus-maze[J].Behav Pharmaco，1993，4（6）：573-580.
[11] Dalvi A，Rodgers RJ.Behavioral effects of diazepam in the murine plus-maze：flumazenil antagonism of enhanced head dipping but not the disinhibition of open-arm avoidance[J].Pharmacol Bichem Behav，1999，62（4）：727-734.
[12] 黄继忠，王祖承.焦虑动物模型的实验方法和药理学评价[J].上海精神医学，2003，15（2）：106-109.
[13] 元晓丽，林文娟.焦虑和抑郁动物模型的研究方法和策略[J].心理科学进展，2005，13（3）：327-333.
[14] 唐安全.百合龙牡汤治疗更年期综合征50例疗效观察[J].中国现代药物应用，2011，5（2）：184.
[15] 张士金.百合地黄汤加味联合西药用于更年期郁证的临床研究[J].中医学报，2012，8（27）：1049-1050.
[16] 杨艳秋，周丽雅.补肾养血法治疗更年期综合征48例临床观察[J].吉林正医药，2012，32（6）：604-605.
[17] 吕新建.滋肾疏肝宁心汤治疗围绝经期综合征65例[J].陕西中医，2010，31（9）：1185-1186.
[18] 周军，甘柏柳，韦桂宁，等.安更方对更年期大鼠内分泌系统影响的实验研究[J].中成药，2009，31（9）：1331-1333.
（收稿日期：2013-04-28）
[关键词] 二至百合浓缩膏；抗焦虑；雌性大鼠；去势；高架十字迷宫；明暗箱
[中图分类号] R363 [文献标识码] A [文章编号] 2095-0616（2013）12-20-03
更年期综合征是妇女在这一时期由于雌激素水平下降所致的以机体内分泌失调、植物神经系统功能紊乱为主，伴有神经心理症状的一组症候群。二至百合组方中包含女贞子、旱莲草、百合、知母、牡蛎等中药组成成分，具有滋阴潜阳，退热安神之功效。主要用于妇女更年期初期，证见阴虚阳亢，阴虚发热，骨蒸潮热，焦虑烦躁，失眠多梦者。本实验通过雌性大鼠双侧卵巢祛除术复制大鼠更年期综合征模型，观察二至百合方对模型大鼠焦虑行为学指标的影响，初步评价药物的改善更年期焦虑作用。
1 资料与方法
1.1 药品及试剂
二至百合浓缩膏，北京中研同仁堂医药研发有限公司（批号20120902）。
1.2 实验动物
Wistar大鼠，75只，雌性，体重（200±20）g，SPF级，购自中国人民解放军军事科学院实验动物中心。许可证编号：SCXK-（军）2007-004。
1.3 仪器
海尔BCD-257SL冷藏冷冻冰箱：青岛海尔股份有限公司；Sartorious BT 124S电子精密天平：赛多利斯科学仪器（北京）有限公司；明暗穿梭箱、高架十字迷宫、高架十字迷宫实验视频分析系统、SLY-ETS小动物行为活动记录分析系统，均由北京硕林苑科技有限公司生产。
1.4 方法
1.4.1 动物模型制备与分组 在适应性饲养5 d后，将75只大鼠随机分为5组，分别为：假手术空白组，模型组，二至百合高剂量（1.92 g浓缩膏/kg）、中剂量（0.96 g浓缩膏/kg）、低剂量（0.48 g浓缩膏/kg）组，每组15只。
模型组及受试样品3个剂量组制备雌性去势大鼠（双侧卵巢切除术）模型[1-2]：大鼠0.1%戊巴比妥钠0.5 mL/100 g体重（50 mg/kg）腹腔注射麻醉。麻醉大鼠取俯卧位，在背部中1/3处剪毛、备皮，碘伏常规消毒。自腰椎沿背部正中线向下做纵行切口约2～3 cm，切开皮肤，沿肩胛线分别于左右两肋下剪开腰肌，暴露出卵巢及紧密相连的子宫，在子宫角上做两个结扎，结扎后切断，将卵巢摘除，缝合皮肤。术后连续腹腔注射72万U/kg青霉素，以防感染，1次/d，连续3 d。术后第3天开始给大鼠阴道涂片观察，连续5 d，每天1次，以确定卵巢完全切除。实验动物从术后的第5天起全部进入动情间期，但动物不再出现动情前期，动情期的雌激素变化，动物基本上符合“更年期”表现。假手术空白组大鼠除不行卵巢摘除外，其余步骤同模型组。
造模后9 d，除假手术空白组和模型组给予等体积蒸馏水外，其余各组开始灌胃给药，每日1次，连续45 d后分别进行高架十字迷宫和明暗箱行为学实验测试（先开展高架十字迷宫实验，其后间隔1周后开展明暗箱实验）。
1.4.2 大鼠高架十字迷宫实验 末次给药30 min后，进行高架十字迷宫行为学的测评。实验开始时，将大鼠放入高架十字迷宫中央，头朝开臂，观察5 min内大鼠的活动情况[3-5]。观察并记录以下各项指标：进入开臂次数，进入闭臂次数，以及在两臂的滞留时间。分别计算大鼠进入开臂的时间占总时间（开臂和闭臂滞留的时间之和）的百分比（open arm time percent，OT%），以及大鼠进入开臂的次数占总次数（开臂与闭臂之和）的百分比（open arm entry percent，OE%）。观察时以大鼠四爪均进入开臂或闭臂为准。
1.4.3 大鼠明暗箱实验 末次给药30 min后，将大鼠置于明箱中央，背朝通道，观察5 min内大鼠的活动情况并记录明暗箱停留时间和穿箱次数。
以上两种行为学检测实验操作时，应保持外界环境安静，每次放入大鼠前清理干净箱内的排泄物，尽可能保证每批次检测的客观性。
1.5 统计学处理
采用SPSS13.0统计软件进行统计处理，数据以（）表示，数据先进行方差齐性检验。方差齐选用One-Way ANOVA法进行各组间比较；方差不齐选用t检验进行组间比较。
2 结果
2.1 二至百合浓缩膏对去势大鼠高架十字迷宫行为活动的影响
实验结果显示，模型组组大鼠与假手术空白组比较，OE%和OT%显著减小（均P<0.01），表现出明显的焦虑症状。二至百合高剂量组可显著减低模型大鼠OT%，与模型组组比较差异有统计学意义（P<0.05）。表明受试品具有较好的改善去势雌性模型大鼠高架十字迷宫焦虑症状的作用。见表1。
2.2 二至百合浓缩膏对去势大鼠明暗箱穿梭行为的影响
研究结果显示，模型组大鼠明箱停留时间和穿箱次数均显著降低，与假手术空白组比较差异有统计学意义（分别P<0.001， P<0.05），表明模型组大鼠去势后，产生了明显的焦虑行为改变。与模型组比较，二至百合高剂量组可显著升高大鼠明箱停留时间和穿箱次数（分别P<0.001，P<0.01），中剂量组可显著升高大鼠明箱停留时间和穿箱次数（均P<0.05）。见表2。 3 讨论
更年期综合征[6]属于中医学“绝经前后诸症”范畴，历代文献关于本病的论述散见于“脏躁”“心悸”“失眠”“眩晕”“头痛”“郁证”等病症中。绝经前后肾脏虚损，肾气渐衰，阴精耗伤，阴阳平衡失调，脏腑功能紊乱而出现绝经前后诸症证候[7]。随着我国人口结构不断老龄化和社会竞争日益激烈，不良的工作环境、家庭关系紧张及精神等因素影响，妇女进入更年期逐渐增加、年龄提早，从而使更年期焦虑症的发病率亦明显增加[8]。因此治疗和缓解更年期综合征焦虑症具有重要的社会意义。
二至百合方由经典方剂“二至丸”和“百合知母汤”合方加减而成，具有滋阴潜阳，退热安神之功效。本研究主要通过雌性大鼠卵巢祛除术复制大鼠更年期综合征模型，进而采用高架十字迷宫和明暗箱实验观察二至百合方对模型大鼠焦虑行为学的影响，评价处方的改善更年期综合征焦虑作用。
高架十字迷宫模型，为抗焦虑研究中公认的非条件反射模型，是抗焦虑研究中应用最广泛的模型之一[9]。它利用动物对新异环境的探究特性相对高悬敞开臂的恐惧心理，形成动物的矛盾行为，进入开放臂的百分数（OE%）和在开放臂停留时间的百分数（OT%）反映的是动物趋近规避冲突的结果，与焦虑程度直接相关。通常抗焦虑药只增加动物对开放臂的探索，使OE%和OT%上升。开放臂和封闭臂总进入次数反映了动物总的运动能力，可用来观察药物有无镇静作用及镇静强度。被保护区的活动性一定程度上与抗焦虑剂的效应相关[10]焦虑动物的OE%和OT%明显降低，经典抗焦虑药物则使两者升高[11]；明暗箱行为实验[12-13]中，明箱活动时间越长，探洞和穿梭次数越多，反映实验动物对新环境的探索欲望水平越高，探索欲越强则代表环境适应能力越强，焦虑水平越低。
本实验以去势大鼠造成更年期模型，考虑动物行为检测的个体差异可能比较大，所以本实验选用了较为经典的2种焦虑行为检测方法进行二至百合胶囊的抗焦虑实验。本研究表明，高架十字迷宫实验中，与假手术空白组比较，去势大鼠进入开闭时间和次数的百分率显著下降，在明暗箱实验中，与假手术空白对照组比较，去势大鼠在明箱停留时间明显缩短，穿箱次数明显减少。由此提示，去势动物处于焦虑状态。高架十字迷宫实验中，二至百合浓缩膏3个剂量组均可增加去势大鼠OE%和OT%值，与模型组比较，中剂量组OE%和OT%值有明显的统计学意义（P<0.05），高剂量组的OT%值与模型组比较差异具有统计学意义（P<0.05）。低剂量组的OE%和OT%值与模型组比较有增加，但无显著性差异。实验结果表明二至百合浓缩膏有一定的抗焦虑作用。明暗箱实验中，二至百合浓缩膏高、中剂量组大鼠的明箱停留时间和穿箱次数与模型组大鼠相比均显著增加（P<0.05或P<0.01）。两个实验结果表明，二至百合浓缩膏在大鼠高架十字迷宫和明暗箱行为学测试中均表现出较好的抗焦虑作用，表明受试品具有较好的改善去势雌性模型大鼠焦虑症状的效应。
根据相关文献报道含有百合[14-15]、知母[16-17]等药物组方在临床上对更年期综合征具有明显治疗作用，有实验表明含有女贞子[18]的复方药物连续灌胃可明显降低更年期大鼠血清促性腺激素FSH含量，对血清E2含量有显著增加作用，使更年期阴虚内热、烦躁不安、失眠等症状得以缓解。
本实验研究结果表明二至百合方对更年期焦虑症状有明显改善，对更年期综合征有一定的缓解作用，但是二至百合方改善更年期综合征模型大鼠焦虑行为学的作用机理有待进一步深入研究。
[参考文献]
[1] 徐叔云.药理实验方法学[M].第2版.北京：人民卫生出版社，199：1293
[2] 董丽，程卫东，李建，等.玫参胶囊对雌性去卵巢大鼠性激素与下丘脑神经递质调节作用的实验研究[J].陕西中医，2009，30（3）：356-357.
[3] 王欣，谢鸣.酸枣仁汤对高架十字迷宫大鼠行为学影响的量效关系评价[J].中国实验方剂学杂志，2004，10（1）：35.
[4] Pellow S，Chopin P，File SE，et al.Validation ofopen：closed arm entries in an elevated plus-maze as ameasureof anxiety in the rat[J].J Neurosci Methods，1985，14（3）：149-167.
[5] Bertoglio LJ，Carobrez AP.Previousmaze experience required to increase open arms avoidance in rats submitted to the elevated plus-maze model of anxiety[J].Behav Brain Res，2000，108（2）：197-203.
[6] 乐杰，谢幸，丰有吉.妇产科学[M].北京：人民卫生出版社，2004：349-352.
[7] 马宝璋，刘瑞芬，杜慧兰.中医妇科学[M].上海：上海科学技术出版社，2007：118-120.
[8] 秦莉花，李晟，易霞，等.中医药治疗更年期焦虑症的思考[J].中国现代医药杂志，2012，14（11）：128-130.
[9] Gard PR，Haigh SJ，Cambursano PT，et al.Strain differences in anxiolytic effects of losartan in the mouse[J].Pharmacol Biochem Behav，2001，69：35-40.
[10] Cole JC，Rodgers RJ.An ethological analysis of the effects of chlordiazepoxide and bretazenil（Ro16-6028） in themurine ele-vated plus-maze[J].Behav Pharmaco，1993，4（6）：573-580.
[11] Dalvi A，Rodgers RJ.Behavioral effects of diazepam in the murine plus-maze：flumazenil antagonism of enhanced head dipping but not the disinhibition of open-arm avoidance[J].Pharmacol Bichem Behav，1999，62（4）：727-734.
[12] 黄继忠，王祖承.焦虑动物模型的实验方法和药理学评价[J].上海精神医学，2003，15（2）：106-109.
[13] 元晓丽，林文娟.焦虑和抑郁动物模型的研究方法和策略[J].心理科学进展，2005，13（3）：327-333.
[14] 唐安全.百合龙牡汤治疗更年期综合征50例疗效观察[J].中国现代药物应用，2011，5（2）：184.
[15] 张士金.百合地黄汤加味联合西药用于更年期郁证的临床研究[J].中医学报，2012，8（27）：1049-1050.
[16] 杨艳秋，周丽雅.补肾养血法治疗更年期综合征48例临床观察[J].吉林正医药，2012，32（6）：604-605.
[17] 吕新建.滋肾疏肝宁心汤治疗围绝经期综合征65例[J].陕西中医，2010，31（9）：1185-1186.
[18] 周军，甘柏柳，韦桂宁，等.安更方对更年期大鼠内分泌系统影响的实验研究[J].中成药，2009，31（9）：1331-1333.
（收稿日期：2013-04-28）