重组甲壳素酶的原核表达及对羧甲基甲壳素的降解作用研究

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本文根据已报道的沙鱼弧菌甲壳素酶编码序列,经密码子优化、合成基因,基于冷激蛋白(cspA)启动子,构建出低温诱导条件下,能够可溶性表达重组甲壳素酶的大肠杆菌菌株。SDS-PAGE电泳表明,诱导产生的酶蛋白为可溶性表达,酶分子量大小为45kd,与理论分子量大小一致。本研究制备出水溶性的羧甲基甲壳素,以此作为甲壳素酶的底物。经二硝基水杨酸法测酶活力,重组蛋白比活为0.8U/mg。单位底物还原糖产率为5.1%左右。结果表明,重组甲壳素酶对羧甲基甲壳素具有显著的降解能力。
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