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摘要 [目的]研究荞麦不同部位提取物抗氧化活性差异，更好地开发荞麦的保健功能。 [方法]分别考察荞麦皮、荞麦粉和荞麦粒乙醇提取物对DPPH自由基和ABTS自由基的清除作用，以及其黄酮类化合物的得率。 [结果]三者乙醇提取物中黄酮类化合物得率最高的为荞麦皮，最小的为荞麦粉，荞麦粒介于两者之间；三者提取物对DPPH自由基和ABTS自由基均具有很好的清除效果，且对DPPH自由基和ABTS自由基清除率达50%的样品浓度比较，荞麦皮浓度最低，荞麦粉最高，荞麦粒浓度介于两者之间。 [结论]荞麦中黄酮类化合物是荞麦提取物具有抗氧化活性作用的重要成分。
关键词 荞麦；抗氧化； 黄酮
中图分类号 S517 文献标识码 A 文章编号 0517-6611（2017）25-0089-02
Abstract [Objective]To study the difference of antioxidant activity of extracts from different parts of buckwheat， so as to better develop the health function of buckwheat.[Method]The scavenging effects of buckwheat husk， buckwheat flour and buckwheat grain ethanol extracts on DPPH radical and ABTS radical scavenging activity， and the yield of flavonoids were investigated. [Result]For the extraction yield of flavonoids compounds， the highest was buckwheat husk， and the lowest was buckwheat flour， buckwheat grain was in the middle. Their ethanol extracts all could scavenge DPPH and ABTS radical，and to compare DPPH and ABTS radicals scavenging concentration rate of 50% of the samples， the content of buckwheat husk was the lowest， the content of buckwheat flour was highest， and the content of buckwheat grain was in the middle. [Conclusion]The flavonoids compounds play an important role in antioxidant activity of buckwheat ethanol extracts.
Key words Buckheat；Antioxidant；Flavone
研究表明，人體内自由基与抗氧化剂的失衡可以加速人体衰老和诱发致病因子的产生[1-3]。体内过剩的自由基需要外源抗氧化剂的摄入才可有效清除，因此寻找安全可靠且来源广泛的天然抗氧化剂是开发功能食品所必须考虑的问题[4-6]。
荞麦作为一种药食兼用的材料应用历史悠久。荞麦特殊的保健功效与荞麦中含有的较多的抗氧化活性成分密不可分[7]。黄酮类化合物具有降血糖、降血脂、预防心脑血管疾病和增强人体免疫力等功效。考察荞麦中黄酮类化合物的含量，对开发荞麦功能产品具有重要的理论意义。国内外关于荞麦中黄酮类化合物的研究报道较多，特别是苦荞中黄酮类化合物的研究较为深入[8]，但已有研究很少涉及荞麦不同部位抗氧化活性比较。笔者以榆林地区当地市售荞麦（甜荞）为研究对象，研究荞麦皮、荞麦粉和荞麦粒抗氧化活性的强弱，以期为提高荞麦市场价值提供理论参考。
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 原料与主要试剂。
该试验所用的荞麦为市售的当地当年产荞麦，所用试剂均为国产分析纯。
1.1.2 主要仪器。
试验所用的主要设备：型号为JYL-C022的九阳多功能料理机；型号为G-100S的歌能超声波清洗器；型号为UV-1780的岛津紫外分光光度计；上海亚荣生化仪器厂生产的型号为RE-52AA旋转蒸发仪等。
1.2 方法
1.2.1 荞麦提取物的制备。
将购买的荞麦部分脱壳处理，对荞麦皮和脱壳后的荞麦果实以及未脱壳的荞麦籽粒分别粉碎处理，过40目筛后分别装在自封口袋中备用。
荞麦中黄酮类化合物的提取工艺按照笔者课题组优化的工艺条件进行：65%的乙醇作为提取剂，以1∶45（g∶mL）的料液比在温度60 ℃的环境中超声提取25 min。将荞麦皮、荞麦粉、荞麦粒的乙醇提取物采用旋转蒸发仪浓缩，然后冷冻干燥制成固型粉末存储待用。荞麦皮、荞麦粉、荞麦粒的乙醇提取物中黄酮类化合物的浓度测定参考相关文献，以芦丁作为标准品进行分析[9]。
1.2.2 对DPPH自由基的清除作用[10]。
取不同浓度的荞麦提取液3 mL于试管中，加入浓度0.05 mg/mL的DPPH甲醇溶液，摇匀后室温下避光保存1 h，然后在波长515 nm处测吸光度值并记录。
2 结果与分析
2.1 荞麦黄酮类化合物的提取率
荞麦皮、荞麦粉和荞麦粒乙醇提取物浓缩干燥后制得的固形物得率如表1所示，可见三者固形物得率最高的为荞麦粉，其次为荞麦粒，最小的为荞麦皮。通过分析三者提取物中黄酮类化合物的得率，可见三者中黄酮类化合物提取率最高的为荞麦皮，其次为荞麦粒，而最小的是荞麦粉。三者固形物的得率与黄酮类化合物的得率变化趋势相反的原因，可能是由于荞麦粉中含有较多的可溶性糖类、淀粉等物质，使得乙醇提取物浓度增高，固形物得率增加。 通过计算三者固形物中黄酮类化合物所占比例可知，固形物中黄酮类化合物所占的比例最大的为荞麦皮固形物，最小的为荞麦粉固形物，荞麦粒固形物介于两者之间，其变化趋势与三者黄酮类化合物的提取变化趋势相似。
2.2 对DPPH自由基的清除作用
由图1可以看出，不同浓度荞麦皮、荞麦粉、荞麦粒提取物对DPPH自由基均有不同程度的清除作用。随着提取物浓度的增加，三者提取物对DPPH自由基的清除作用均增强，且随浓度的不断增加，清除作用趋势减弱。
对DPPH自由基清除率随提取物浓度变化的数据进行多项式拟合，拟合结果见表2。由表2可知，三者均可拟合为一元二次方程，且拟合效果均较好。通过拟合的二次方程计算对DPPH自由基清除率的IC50值，分析可知荞麦粉提取物IC50值最大，荞麦皮的IC50值最小，荞麦粒IC50值介于两者之间。试验结果说明，同样质量的荞麦粉提取物对DPPH自由基的清除作用最弱，荞麦皮提取物最强，荞麦粒介于两者之间。
2.3 对ABTS自由基的清除作用
由图2可见，与对DPPH自由基的清除作用相似，不同濃度荞麦提取物对ABTS自由基均有清除作用，随着提取物浓度的增加，清除作用增强，且随着提取物浓度的增加，清除ABTS自由基的变化趋势减缓。
同样对荞麦皮、荞麦粉和荞麦粒的提取物清除ABTS自由基的数据进行多项式拟合，结果见表2。由表2可知，采用一元二次方程具有很好的拟合效果，R值均达到小数点后2个9。通过拟合的二次方程计算荞麦提取物对ABTS自由基的IC50值，其中值最大的为荞麦粉提取物，最小的为荞麦皮提取物，荞麦粒介于两者之间。试验结果说明，对 ABTS自由基的清除作用最弱的为荞麦粉，最强的为荞麦皮，荞麦粒介于两者之间。
3 结论
通过上述试验分析可以得出：荞麦粉提取物中黄酮类化合物含量最低，对DPPH和ABTS自由基的清除作用最弱，即IC50最高；荞麦皮提取物中黄酮类化合物含量最高，对DPPH和ABTS自由基的清除作用最强，即IC50最低；荞麦粒提取物黄酮含量，以及对DPPH和ABTS自由基的清除作用处于荞麦粉和荞麦皮提取物之间。
荞麦皮较荞麦粉和籽粒含有更多的天然抗氧化成分，如黄酮化合物等，合理开发利用荞麦皮，可很好地提高荞麦的经济附加值，为荞麦今后深加工指出又一条可行途径。
参考文献
[1] 赵保路.自由基、营养、天然抗氧化剂与衰老[J].生物物理学报，2010，26（1）：26-36.
[2] HARMAN D，EDDY D E. Free radical theory of aging：Beneficial effect of adding antioxidant to the maternal mouse diet on life span of offspring；Possible explanation of the sex different in longevity[J].Age，1979，2（4）：109-112.
[3] FINKEL T.Ageing：A toast to long life[J].Nature，2003，425：132-133.
[4] 凌关庭.天然抗氧化剂及其清除氮自由基的进展[J].食品工业，2000（3）：19-22.
[5] 梁云，王洪新.几种天然抗氧化剂清除自由基能力的比较研究[J].安徽农业科学，2008，36（6）：2181-2183.
[6] 田云，卢向阳，易克，等.天然抗氧化剂清除氧自由基的能力[J].湖南农业大学学报（自然科学版），2004，30（3）：209-211.
[7] 李红敏.荞麦多肽的制备及其抗氧化活性的研究[D].上海：上海水产大学，2007.
[8] 于智峰，付英娟，王敏，等.苦荞黄酮提取物体外清除自由基活性的研究[J].食品科技，2007，32（3）：126-129.
[9] 黄海燕.苦荞黄酮与皂苷的研究[D].无锡：江南大学，2008：20-21.
[10] AWIKA J M，ROONEY L W，WU X L，et al.Screening methods to measure antioxidant activity of Sorghum（Sorghum bicolor）and Sorghum products[J].Journal of agriculture food and chemistry，2003，51（23）：6657-6662.
[11] SIDDHURAJU P.Antioxidant activity of polyphenolic compounds extracted from defatted raw and dry heated Tamarindus indica seed coat[J].LWT-Food science and technology，2007，40（6）：982-990.
关键词 荞麦；抗氧化； 黄酮
中图分类号 S517 文献标识码 A 文章编号 0517-6611（2017）25-0089-02
Abstract [Objective]To study the difference of antioxidant activity of extracts from different parts of buckwheat， so as to better develop the health function of buckwheat.[Method]The scavenging effects of buckwheat husk， buckwheat flour and buckwheat grain ethanol extracts on DPPH radical and ABTS radical scavenging activity， and the yield of flavonoids were investigated. [Result]For the extraction yield of flavonoids compounds， the highest was buckwheat husk， and the lowest was buckwheat flour， buckwheat grain was in the middle. Their ethanol extracts all could scavenge DPPH and ABTS radical，and to compare DPPH and ABTS radicals scavenging concentration rate of 50% of the samples， the content of buckwheat husk was the lowest， the content of buckwheat flour was highest， and the content of buckwheat grain was in the middle. [Conclusion]The flavonoids compounds play an important role in antioxidant activity of buckwheat ethanol extracts.
Key words Buckheat；Antioxidant；Flavone
研究表明，人體内自由基与抗氧化剂的失衡可以加速人体衰老和诱发致病因子的产生[1-3]。体内过剩的自由基需要外源抗氧化剂的摄入才可有效清除，因此寻找安全可靠且来源广泛的天然抗氧化剂是开发功能食品所必须考虑的问题[4-6]。
荞麦作为一种药食兼用的材料应用历史悠久。荞麦特殊的保健功效与荞麦中含有的较多的抗氧化活性成分密不可分[7]。黄酮类化合物具有降血糖、降血脂、预防心脑血管疾病和增强人体免疫力等功效。考察荞麦中黄酮类化合物的含量，对开发荞麦功能产品具有重要的理论意义。国内外关于荞麦中黄酮类化合物的研究报道较多，特别是苦荞中黄酮类化合物的研究较为深入[8]，但已有研究很少涉及荞麦不同部位抗氧化活性比较。笔者以榆林地区当地市售荞麦（甜荞）为研究对象，研究荞麦皮、荞麦粉和荞麦粒抗氧化活性的强弱，以期为提高荞麦市场价值提供理论参考。
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 原料与主要试剂。
该试验所用的荞麦为市售的当地当年产荞麦，所用试剂均为国产分析纯。
1.1.2 主要仪器。
试验所用的主要设备：型号为JYL-C022的九阳多功能料理机；型号为G-100S的歌能超声波清洗器；型号为UV-1780的岛津紫外分光光度计；上海亚荣生化仪器厂生产的型号为RE-52AA旋转蒸发仪等。
1.2 方法
1.2.1 荞麦提取物的制备。
将购买的荞麦部分脱壳处理，对荞麦皮和脱壳后的荞麦果实以及未脱壳的荞麦籽粒分别粉碎处理，过40目筛后分别装在自封口袋中备用。
荞麦中黄酮类化合物的提取工艺按照笔者课题组优化的工艺条件进行：65%的乙醇作为提取剂，以1∶45（g∶mL）的料液比在温度60 ℃的环境中超声提取25 min。将荞麦皮、荞麦粉、荞麦粒的乙醇提取物采用旋转蒸发仪浓缩，然后冷冻干燥制成固型粉末存储待用。荞麦皮、荞麦粉、荞麦粒的乙醇提取物中黄酮类化合物的浓度测定参考相关文献，以芦丁作为标准品进行分析[9]。
1.2.2 对DPPH自由基的清除作用[10]。
取不同浓度的荞麦提取液3 mL于试管中，加入浓度0.05 mg/mL的DPPH甲醇溶液，摇匀后室温下避光保存1 h，然后在波长515 nm处测吸光度值并记录。
2 结果与分析
2.1 荞麦黄酮类化合物的提取率
荞麦皮、荞麦粉和荞麦粒乙醇提取物浓缩干燥后制得的固形物得率如表1所示，可见三者固形物得率最高的为荞麦粉，其次为荞麦粒，最小的为荞麦皮。通过分析三者提取物中黄酮类化合物的得率，可见三者中黄酮类化合物提取率最高的为荞麦皮，其次为荞麦粒，而最小的是荞麦粉。三者固形物的得率与黄酮类化合物的得率变化趋势相反的原因，可能是由于荞麦粉中含有较多的可溶性糖类、淀粉等物质，使得乙醇提取物浓度增高，固形物得率增加。 通过计算三者固形物中黄酮类化合物所占比例可知，固形物中黄酮类化合物所占的比例最大的为荞麦皮固形物，最小的为荞麦粉固形物，荞麦粒固形物介于两者之间，其变化趋势与三者黄酮类化合物的提取变化趋势相似。
2.2 对DPPH自由基的清除作用
由图1可以看出，不同浓度荞麦皮、荞麦粉、荞麦粒提取物对DPPH自由基均有不同程度的清除作用。随着提取物浓度的增加，三者提取物对DPPH自由基的清除作用均增强，且随浓度的不断增加，清除作用趋势减弱。
对DPPH自由基清除率随提取物浓度变化的数据进行多项式拟合，拟合结果见表2。由表2可知，三者均可拟合为一元二次方程，且拟合效果均较好。通过拟合的二次方程计算对DPPH自由基清除率的IC50值，分析可知荞麦粉提取物IC50值最大，荞麦皮的IC50值最小，荞麦粒IC50值介于两者之间。试验结果说明，同样质量的荞麦粉提取物对DPPH自由基的清除作用最弱，荞麦皮提取物最强，荞麦粒介于两者之间。
2.3 对ABTS自由基的清除作用
由图2可见，与对DPPH自由基的清除作用相似，不同濃度荞麦提取物对ABTS自由基均有清除作用，随着提取物浓度的增加，清除作用增强，且随着提取物浓度的增加，清除ABTS自由基的变化趋势减缓。
同样对荞麦皮、荞麦粉和荞麦粒的提取物清除ABTS自由基的数据进行多项式拟合，结果见表2。由表2可知，采用一元二次方程具有很好的拟合效果，R值均达到小数点后2个9。通过拟合的二次方程计算荞麦提取物对ABTS自由基的IC50值，其中值最大的为荞麦粉提取物，最小的为荞麦皮提取物，荞麦粒介于两者之间。试验结果说明，对 ABTS自由基的清除作用最弱的为荞麦粉，最强的为荞麦皮，荞麦粒介于两者之间。
3 结论
通过上述试验分析可以得出：荞麦粉提取物中黄酮类化合物含量最低，对DPPH和ABTS自由基的清除作用最弱，即IC50最高；荞麦皮提取物中黄酮类化合物含量最高，对DPPH和ABTS自由基的清除作用最强，即IC50最低；荞麦粒提取物黄酮含量，以及对DPPH和ABTS自由基的清除作用处于荞麦粉和荞麦皮提取物之间。
荞麦皮较荞麦粉和籽粒含有更多的天然抗氧化成分，如黄酮化合物等，合理开发利用荞麦皮，可很好地提高荞麦的经济附加值，为荞麦今后深加工指出又一条可行途径。
参考文献
[1] 赵保路.自由基、营养、天然抗氧化剂与衰老[J].生物物理学报，2010，26（1）：26-36.
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[3] FINKEL T.Ageing：A toast to long life[J].Nature，2003，425：132-133.
[4] 凌关庭.天然抗氧化剂及其清除氮自由基的进展[J].食品工业，2000（3）：19-22.
[5] 梁云，王洪新.几种天然抗氧化剂清除自由基能力的比较研究[J].安徽农业科学，2008，36（6）：2181-2183.
[6] 田云，卢向阳，易克，等.天然抗氧化剂清除氧自由基的能力[J].湖南农业大学学报（自然科学版），2004，30（3）：209-211.
[7] 李红敏.荞麦多肽的制备及其抗氧化活性的研究[D].上海：上海水产大学，2007.
[8] 于智峰，付英娟，王敏，等.苦荞黄酮提取物体外清除自由基活性的研究[J].食品科技，2007，32（3）：126-129.
[9] 黄海燕.苦荞黄酮与皂苷的研究[D].无锡：江南大学，2008：20-21.
[10] AWIKA J M，ROONEY L W，WU X L，et al.Screening methods to measure antioxidant activity of Sorghum（Sorghum bicolor）and Sorghum products[J].Journal of agriculture food and chemistry，2003，51（23）：6657-6662.
[11] SIDDHURAJU P.Antioxidant activity of polyphenolic compounds extracted from defatted raw and dry heated Tamarindus indica seed coat[J].LWT-Food science and technology，2007，40（6）：982-990.