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目的：从重组人Ｂｃｌ－２质粒中制备对基因重组和ＤＮＡ测序等有用的ｐＢｌｕｅｓｃｒｉｐｔⅡＫＳ（－）载体。方法：先将重组人Ｂｃｌ－２质粒转化ＤＨ５α菌株，小规模制备此质粒ＤＮＡ，然后从低熔点琼脂糖凝胶中回收其中用ＥｃｏＲ Ⅰ酶切的线性ｐＢｌｕｅｓｃｒｉｐｔⅡＫＳ（－）载体，用Ｔ４ＤＮＡ连接酶催化连接并再次转化ＤＨ５α细菌，并用限制酶切鉴定，最后进行冻存和大量制备及纯化。结果：限制酶切分析证明两次转化