【摘 要】
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目的获得表达人毒蕈碱样乙酰胆碱Ⅰ型受体(hm1R)的工程细胞株(CHO-hm1R)并鉴定表达受体是否具有相应的功能活性.方法以健康人基因组DNA为模板,PCR扩增hm1R之cDNA,并构建pcDNA
【机 构】
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武汉大学中南医院病理科,北京放射医学研究所药理毒理研究室,武汉大学中南医院检验科
【基金项目】
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国家自然科学基金，军队医药卫生科研项目
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目的获得表达人毒蕈碱样乙酰胆碱Ⅰ型受体(hm1R)的工程细胞株(CHO-hm1R)并鉴定表达受体是否具有相应的功能活性.方法以健康人基因组DNA为模板,PCR扩增hm1R之cDNA,并构建pcDNA3.1(+)-hm1R表达载体,转染CHO-K1细胞获得CHO-hm1R工程细胞株,将不同浓度的乙酰胆碱作用于细胞,以Fura-2为荧光探针检测细胞内钙离子浓度变化;同时,观察阿托品预处理对乙酰胆碱作用的影响.结果成功得到CHO-hm1R工程细胞株;乙酰胆碱10,100 μmol·L-1均可增高细胞内
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