论文部分内容阅读
目的：构建小鼠GITR（mGITR）的真核表达载体,转染COS-7细胞表达小鼠GITR蛋白。方法：用TRIzol试剂抽提小鼠脾细胞总RNA,经RT-PCR扩增出GITR全长基因,构建真核重组载体pIRES2-EGFP-mGITR,经鉴定后采用脂质体介导DNA法转染COS-7细胞。结果：从小鼠脾细胞中成功扩增得到GITR全长基因。重组载体pIRES2-EGFP-mGITR转染COS-7细胞后,经荧光显微镜观察可见绿色荧光,提取蛋白后经蛋白质印迹鉴定有目的蛋白mGITR。结论：成功构建了小鼠GITR基因的真核