【摘 要】
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目的 探索在前列腺癌中前列腺特异性膜抗原(PSMA)的新型剪切变异体PSM-E对炎性细胞因子的分泌,及其对单核细胞趋化的影响.方法 采用免疫组织化学染色法检测110例原发性前列腺
【机 构】
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中山大学临床检验标准化研究中心,广东广州510080;中山大学热带病防治研究教育部重点实验室,广东广州510080;中山大学-香港大学(粤港)传染病监测联合实验室,广东广州510080;中山大学中山医
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目的 探索在前列腺癌中前列腺特异性膜抗原(PSMA)的新型剪切变异体PSM-E对炎性细胞因子的分泌,及其对单核细胞趋化的影响.方法 采用免疫组织化学染色法检测110例原发性前列腺癌组织中PSM-E与肿瘤相关巨噬细胞(TAMs)表面特异性蛋白CD206的表达.用siRNA转染LNCaP细胞干扰PSM-E的表达作为实验组,对LNCaP细胞转染对任何基因无干扰作用的siRNA作为对照组.利用佛波酯和白细胞介素-4(IL-4)刺激单核细胞THP-1诱导其分化为M2型TAMs.将M2型TAMs分别与实验组和对照组LNCaP细胞共培养72 h后,收集培养基上清,采用炎症因子芯片检测共培养系统中细胞因子的变化.将单核细胞系THP-1分别与实验组和对照组LNCaP细胞共培养72 h后,结晶紫染色观察单核细胞趋化情况.结果 110例原发性前列腺癌组织中,PSM-E呈高表达的阳性率为54.5％ (60/110),CD206呈高表达的阳性率为58.1％(64/110).Spearman相关性分析结果显示,以免疫组化评分为指标,PSM-E与CD206表达呈负相关(r=-0.5,P＜0.01).成功构建PSM-E敲低的前列腺癌LNCaP细胞模型和M2型TAMs细胞模型(THP-1来源).与阴性对照组相比,PSM-E敲低细胞组的PSM-E的mRNA水平表达量显著降低(P＜0.05);与M0型巨噬细胞相比,M2型TAMs细胞标志物基因CCL17、CCL18、CCL22的表达显著增高(P＜0.05).与对照组相比,将敲低PSM-E的前列腺癌LNCaP细胞与TAMs共培养后,细胞培养上清中的干扰素州秀导的T细胞α型趋化因子(ITAC)、粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)、Fractalkine、巨噬细胞炎性蛋白-1α(MIP-1α)、MIP-1β、MIP-3α、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-1β(IL-1β)、IL-4、IL-7、IL-8、IL-10、IL-13、IL-21、IL-23炎性细胞因子均呈较强升高,提示PSM-E可抑制肿瘤微环境中炎症细胞因子的分泌.与对照组相比,将THP-1细胞与敲低PSM-E的前列腺癌LNCaP细胞共培养后,趋化的穿过培养小室的细胞数量显著增加.结论 PSM-E具有抑制肿瘤微环境中炎性细胞因子的产生,进而抑制单核细胞趋化的新功能,提示PSM-E可成为肿瘤相关巨噬细胞靶向性治疗的一个新分子靶点.
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