黑胸大蠊浓核病毒磷脂酶A2功能区的克隆及其表达

来源 :中国病毒学 | 被引量 : 0次 | 上传用户：yeyayuqiya

【摘要】

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通过RT—PCR扩增获得PfDNV结构蛋白基因VPl含磷脂酶A2（PLA2）功能区片段，将其连接到pMD18-T载体上并亚克隆到原核表达载体pET28a和pET26b，构建阅读框架正确的重组表达载体pET28a-P

【作者】

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俞海洋张珈敏杨波蒋洪周亮卢杰陈伍国李斗林胡远

【机构】

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武汉大学生命科学学院病毒学国家重点实验室

【出处】

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中国病毒学

【发表日期】

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2006年2期

【关键词】

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黑胸大蠊浓核病毒(PfDNV) 磷脂酶A2 原核表达 Periplaneta fuliginosa densovirus （PIDNV） phospholip

【基金项目】

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致谢：武汉大学生科院微生物遗传室沈萍教授和唐兵教授对本研究给予了大力支持和热情帮助.在此表示衷心地感谢.

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通过RT—PCR扩增获得PfDNV结构蛋白基因VPl含磷脂酶A2（PLA2）功能区片段，将其连接到pMD18-T载体上并亚克隆到原核表达载体pET28a和pET26b，构建阅读框架正确的重组表达载体pET28a-PLA和pET26b—PLA，转化大肠杆菌BL21-codonplus（DE3）-RIL，经IPTG诱导，SDS-PAGE显示得到了目的融合蛋白，以抗组氨酸的单克隆抗体对经Ni-NTA亲和层析柱纯化的目的蛋白进行了western blot鉴定，结果表明成功表达PfDNV结构蛋白PLA2，对于研究该

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