【摘 要】
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目的克隆中国人N端部分缺失的IкBα基因,为进一步应用其进行抗肿瘤基因治疗研究打下基础.方法从中国人外周血中分离单核细胞,采用多聚赖氨酸贴壁刺激0.5h后提取总RNA.应用逆
【机 构】
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哈尔滨医科大学附属第一医院,重庆医科大学第二临床学院
【基金项目】
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国家自然科学基金资助项目 ( 30 0 70 2 97)
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目的克隆中国人N端部分缺失的IкBα基因,为进一步应用其进行抗肿瘤基因治疗研究打下基础.方法从中国人外周血中分离单核细胞,采用多聚赖氨酸贴壁刺激0.5h后提取总RNA.应用逆转录PCR法,以自行设计的引物扩增全序IкBα基因,应用巢式PCR法扩增N端部分缺失的IкBα基因,用TA克隆技术将目的基因连接到pGEM-T质粒载体中,进行测序并与已知IcBa序列进行同源性分析.结果测序结果表明我们所克隆的目的基因,其基因序列与CenBank中人IкBa基因序列仅有5个碱基不同但所编码氨基酸仅1个发生改变.结论已成
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