论文部分内容阅读
目的
观察游离脂肪酸(FFA)对人成熟脂肪细胞中miR-335表达的调节作用。
方法体外培养人前体脂肪细胞,待生长融合后,采用1-甲基-3异丁基黄嘌呤(MIX)、胰岛素、地塞米松、罗格列酮方案诱导人前体脂肪细胞分化为成熟的脂肪细胞,使用含1 mmol/L混合FFA的前脂肪细胞培养基(PAM)进行干预,分别培养4、8、24 h后收集细胞,同时设未干预的人成熟脂肪细胞为对照组,采用实时荧光定量PCR技术检测成熟脂肪细胞中miR-335的相对表达量。
结果对照组细胞中4、8、24 h miR-335的相对表达量与0 h相比差异均无统计学意义(P均>0.05)。使用snRU6作为内参时,FFA干预人成熟脂肪细胞4、8、24 h后miR-335的相对表达量分别为9.03±0.31、9.85±2.41和11.23±0.62,与对照组0 h相比,差异均有统计学意义(P均<0.05);使用miR-103作为内参时,同等时间点miR-335的相对表达量分别为4.73±0.60、5.38±1.25和4.57±0.52,与对照组0 h相比,差异均有统计学意义(P均<0.05)。
结论FFA可明显上调人成熟脂肪细胞中miR-335的表达,为进一步探索miR-335在脂肪细胞中的功能提供了一定的理论依据。