【摘 要】
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目的 通过蛋白激酶抑制分析探讨了结肠癌细胞株HT-29与Colo-205增殖的分子机制。方法 选择多种蛋白激酶抑制剂（剂量从0.0006μmol/L开始，倍增到20μmol/L,共16个剂量组）作用于HT-29与Colo-205细胞，CCK8法检测细胞增殖，筛选有效抑制2种细胞增殖的药物；转染siRNA敲低HT-29细胞中酪氨酸蛋白激酶SRC的表达，并采用慢病毒表达质粒在Colo-205细胞中过表
【机 构】
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山西医科大学基础医学研究中心细胞生理学教育部重点实验室
【基金项目】
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国家自然科学青年基金（81902513）； 山西省回国留学人员科研资助项目（2020-076）；
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目的 通过蛋白激酶抑制分析探讨了结肠癌细胞株HT-29与Colo-205增殖的分子机制。方法 选择多种蛋白激酶抑制剂（剂量从0.0006μmol/L开始，倍增到20μmol/L,共16个剂量组）作用于HT-29与Colo-205细胞，CCK8法检测细胞增殖，筛选有效抑制2种细胞增殖的药物；转染siRNA敲低HT-29细胞中酪氨酸蛋白激酶SRC的表达，并采用慢病毒表达质粒在Colo-205细胞中过表达SRC,检测蛋白激酶抑制剂对两种细胞增殖的影响；构建HT-29细胞裸鼠荷瘤模型，检测抑制剂对小鼠肿瘤生长的影响。结果 达沙替尼（Dasatinib）或BMS-754807单独作用于HT-29细胞后，抑制效果不明显，而两者联合使用，可有效抑制HT-29细胞增殖（P=0.005）。AZD-6244单独作用于Colo-205细胞，可明显抑制细胞增殖（P=0.027）。BMS-754807单独作用于敲低SRC的HT-29细胞株，与联合使用BMS-754807和Dasatinib组相比，对细胞的抑制效果基本一致。Colo-205过表达SRC后，与对照组相比，AZD-6244抑制细胞增殖效果更明显（P=0.021）。HT-29裸鼠荷瘤实验结果表明，与对照组和BMS-754807组相比，联合用药组的小鼠肿瘤体积增长率明显降低（P=0.03）。结论 HT-29细胞与Colo-205细胞的增殖受不同信号通路的调控，其中，HT-29细胞的增殖同时受胰岛素受体信号通路与SRC信号通路调控，且两条通路相互独立；Colo-205细胞增殖主要受MEK信号通路调控。
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