【摘 要】
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目的 探究聚ADP-核糖聚合酶-1（PARP1）在喉鳞状细胞癌（LSCC）中的表达及其对LSCC细胞DNA氧化损伤与凋亡的影响。方法 收集40例患者的LSCC组织及癌旁组织样本，采用免疫组化染色和qRT-PCR检测LSCC组织与癌旁组织中PARP1的表达。采用不同浓度Menadione诱导LSCC细胞系Hep-2,MTT法检测不同浓度诱导下细胞增殖抑制率。将Hep-2细胞随机分为对照组（正常培养）
【基金项目】
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国家重点实验室开放课题（SKL-HIDCA-2021-6）；
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目的 探究聚ADP-核糖聚合酶-1（PARP1）在喉鳞状细胞癌（LSCC）中的表达及其对LSCC细胞DNA氧化损伤与凋亡的影响。方法 收集40例患者的LSCC组织及癌旁组织样本，采用免疫组化染色和qRT-PCR检测LSCC组织与癌旁组织中PARP1的表达。采用不同浓度Menadione诱导LSCC细胞系Hep-2,MTT法检测不同浓度诱导下细胞增殖抑制率。将Hep-2细胞随机分为对照组（正常培养）、Men组（20μmol/L Menadione处理）、Men+PARP1抑制剂组（20μmol/L Menadione+10μmol/L PARP1抑制剂Olaparib共处理）。MTT法计算各组细胞增殖抑制率；流式细胞术检测各组细胞内活性氧（ROS）水平；细胞免疫荧光染色观察各组细胞DNA损伤标记分子γ-H2AX焦点生成情况；Western blot测定各组细胞γ-H2AX、DNA-PKcs、BRCA1、LIG4、Caspase-3及Caspase-9蛋白表达；Hoechst33258染色观察各组细胞凋亡情况。结果 LSCC组织中PARP1阳性表达率及PARP1 mRNA表达均明显高于癌旁组织（P＜0.01）。Hep-2细胞经不同浓度Menadione诱导后，细胞增殖抑制率均升高（P＜0.05）。与对照组比较，Men组和Men+PARP1抑制剂组的细胞增殖抑制率升高，细胞ROS水平升高，γ-H2AX焦点形成明显增加，γ-H2AX蛋白表达上调，DNA-PKcs、BRCA1、LIG4蛋白表达均下调，细胞出现浓缩、碎裂的蓝色凋亡体，Caspase-3和Caspase-9蛋白表达上调，差异均有统计学意义（P＜0.05），且Men+PARP1抑制剂组以上变化较Men组更明显（P＜0.05）。结论 PARP1在LSCC组织中高表达，抑制其表达能够进一步加重Menadione诱导的Hep-2细胞DNA氧化损伤，并促进细胞凋亡。
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