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植物油脂经过加工后，天然存在的抗氧化成分会大量损失。为保证油脂的质量安全，防止油脂在贮存过程中发生氧化酸败，在油脂中添加合成抗氧化剂是最有效的解决方法之一。按来源不同，抗氧化剂主要分为天然和人工合成抗氧化剂，为了节约成本，企业一般会使用人工合成抗氧化剂，以延长食品的保质期。食品中的合成抗氧化剂主要有丁基羟基茴香醚（BHA）、2，6-二叔丁基-4-甲基苯酚（BHT）、叔丁基对苯二酚（TBHQ）、没食子酸丙酯（PG）等。目前抗氧化剂的检测方法主要有比色法、气相色谱法、液相色谱法、电化学分析法、气质联用法、液质联用法等。GB/T 5009.32-2017食品中9种抗氧化剂的测定，规定了相关技术方法的检测范围，本研究利用超高效液相色谱对该方法进行了优化，缩短了分析时间，简化了处理过程，且有更高的灵敏度、更低的定量限。
一、材料与方法
1.仪器、试剂与标准品。（1）仪器。LC30A超高效液相色谱仪（日本岛津公司）； D型干式氮吹仪（上海沪析实业有限公司）；MS3涡旋震荡器（德国IKA公司）；Allegra 64R低温高速离心机 （美国贝克曼公司）；ME204电子天平（瑞士梅特勒公司）。（2）试剂与标准品。试剂： 乙腈、正己烷（HPLC级， 美国天地）、甲酸（HPLC级， 阿拉丁）。标准品：乙腈中9种抗氧化剂混标（GB 5009.32-2016，编号为80861JH，北京坛墨质检）。
2.实验方法。（1）标准溶液的制备。混合标准溶液：准确称取1000μg/mL混合標准溶液2.5mL，用乙腈稀释定容至25mL，配置成浓度为100μg/mL的混合标准储备液。分别取0.5、1.0、2.0、5.0、10.0mL储备液，用乙腈稀释定容至10mL，配置成浓度为5.0、10.0、20.0、50.0、100.0μg/mL系列混合标准工作液。
（2）样品处理。称取约1.00g样品于50mL离心管中，加入5mL乙腈饱和的正己烷溶液，涡旋2min，再加入5mL正己烷饱和的乙腈溶液涡旋提取2min，8000r/min离心5分钟，去除正己烷层，吸取乙腈层2.00mL，40℃氮气吹干，加入0.5mL30%乙腈水溶液，涡旋1min，溶液过0.22μm尼龙滤膜，液相色谱测定。
3.色谱条件。色谱柱：Shim-pack XR-ODS III（2mmL×75mm，1.6μm）；流速：0.5mL/min；进样量5μL，柱温40℃；流动相A：0.1%甲酸乙腈溶液；流动相B：0.1%甲酸水溶液；洗脱程序（A）0-1.5min，30%升至40%；1.5-6.5min，升至42%；6.5-7.5min保持90%；检测波长：280nm；检测器采集频率：100ms；外标法定量。
二、结果与分析
1.标准谱图。本文采用超高效液相色谱法测定9种合成抗氧化剂，紫外检测器检测频率为100ms，色谱图如图1所示。
2.标准曲线及定量限。依次测定浓度为5、10、20、50、100mg/L混合标准系列工作溶液，得到线性回归方程，线性关系良好。以10μg/mL浓度的混标标准品溶液进行液相分析，以各目标峰的信噪比（S/N≥10）分别确认9种抗氧化剂的定量限，如表1表示。
3.准确度和精密度。选择空白样品测定6次，计算目标物含量后，准确添加9种抗氧化剂，质量浓度均为5、50mg/kg，按确定的方法进行处理（n=6），计算加标回收率和精密度，见表2。
本研究基于超高效液相色谱法建立了一种处理简单、快速、准确定量分析食用油中没食子酸丙酯、2，4，5-三羟基苯丁酮、叔丁基对苯二酚、去甲二氢愈创木酸、叔丁基对羟基茴香醚BHA、2，6-二叔丁基-4-羟甲基苯酚、没食子酸辛酯、2，6-二叔丁基对甲基苯酚、没食子酸十二酯等9种抗氧化剂的方法，与GB 5009.32-2016中第一法相比，简化了净化过程，提高了检测灵敏度，缩短了检测分析时间，节省了试剂用量。
结果显示，本方法可以在11min内完成9种化合物的检测，具有良好的精确度和准确度，在5.0-50μg/mL范围内，信号响应值呈现良好的线性关系，线性相关系数大于0.999，定量为0.3-2.4μg/kg，加标回收率为89.6%-96.1%，相对标准偏差在1.3%-7.0%。（基金项目：2020年杨凌职业技术学院校内基金项目“食品中多种抗氧化剂的快速检测研究”，编号ZK20-61。）
作者简介：崔利辉（1987-），男，汉族，陕西杨凌，杨凌职业技术学院生物工程分院，硕士研究生，助教；研究方向：食品质量安全检测。
一、材料与方法
1.仪器、试剂与标准品。（1）仪器。LC30A超高效液相色谱仪（日本岛津公司）； D型干式氮吹仪（上海沪析实业有限公司）；MS3涡旋震荡器（德国IKA公司）；Allegra 64R低温高速离心机 （美国贝克曼公司）；ME204电子天平（瑞士梅特勒公司）。（2）试剂与标准品。试剂： 乙腈、正己烷（HPLC级， 美国天地）、甲酸（HPLC级， 阿拉丁）。标准品：乙腈中9种抗氧化剂混标（GB 5009.32-2016，编号为80861JH，北京坛墨质检）。
2.实验方法。（1）标准溶液的制备。混合标准溶液：准确称取1000μg/mL混合標准溶液2.5mL，用乙腈稀释定容至25mL，配置成浓度为100μg/mL的混合标准储备液。分别取0.5、1.0、2.0、5.0、10.0mL储备液，用乙腈稀释定容至10mL，配置成浓度为5.0、10.0、20.0、50.0、100.0μg/mL系列混合标准工作液。
（2）样品处理。称取约1.00g样品于50mL离心管中，加入5mL乙腈饱和的正己烷溶液，涡旋2min，再加入5mL正己烷饱和的乙腈溶液涡旋提取2min，8000r/min离心5分钟，去除正己烷层，吸取乙腈层2.00mL，40℃氮气吹干，加入0.5mL30%乙腈水溶液，涡旋1min，溶液过0.22μm尼龙滤膜，液相色谱测定。
3.色谱条件。色谱柱：Shim-pack XR-ODS III（2mmL×75mm，1.6μm）；流速：0.5mL/min；进样量5μL，柱温40℃；流动相A：0.1%甲酸乙腈溶液；流动相B：0.1%甲酸水溶液；洗脱程序（A）0-1.5min，30%升至40%；1.5-6.5min，升至42%；6.5-7.5min保持90%；检测波长：280nm；检测器采集频率：100ms；外标法定量。
二、结果与分析
1.标准谱图。本文采用超高效液相色谱法测定9种合成抗氧化剂，紫外检测器检测频率为100ms，色谱图如图1所示。
2.标准曲线及定量限。依次测定浓度为5、10、20、50、100mg/L混合标准系列工作溶液，得到线性回归方程，线性关系良好。以10μg/mL浓度的混标标准品溶液进行液相分析，以各目标峰的信噪比（S/N≥10）分别确认9种抗氧化剂的定量限，如表1表示。
3.准确度和精密度。选择空白样品测定6次，计算目标物含量后，准确添加9种抗氧化剂，质量浓度均为5、50mg/kg，按确定的方法进行处理（n=6），计算加标回收率和精密度，见表2。
本研究基于超高效液相色谱法建立了一种处理简单、快速、准确定量分析食用油中没食子酸丙酯、2，4，5-三羟基苯丁酮、叔丁基对苯二酚、去甲二氢愈创木酸、叔丁基对羟基茴香醚BHA、2，6-二叔丁基-4-羟甲基苯酚、没食子酸辛酯、2，6-二叔丁基对甲基苯酚、没食子酸十二酯等9种抗氧化剂的方法，与GB 5009.32-2016中第一法相比，简化了净化过程，提高了检测灵敏度，缩短了检测分析时间，节省了试剂用量。
结果显示，本方法可以在11min内完成9种化合物的检测，具有良好的精确度和准确度，在5.0-50μg/mL范围内，信号响应值呈现良好的线性关系，线性相关系数大于0.999，定量为0.3-2.4μg/kg，加标回收率为89.6%-96.1%，相对标准偏差在1.3%-7.0%。（基金项目：2020年杨凌职业技术学院校内基金项目“食品中多种抗氧化剂的快速检测研究”，编号ZK20-61。）
作者简介：崔利辉（1987-），男，汉族，陕西杨凌，杨凌职业技术学院生物工程分院，硕士研究生，助教；研究方向：食品质量安全检测。