【摘 要】
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目的:建立一种新型阪崎肠杆菌快速筛选检测方法——交叉引物恒温扩增结合免疫金标检测方法。方法:针对阪崎肠杆菌16S-23S rDNA间区序列设计特异性引物及探针,建立交叉引物等
【机 构】
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天津科技大学食品工程与生物技术学院,天津出入境检验检疫局
【基金项目】
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国家质检总局科研项目(2011IK241)
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目的:建立一种新型阪崎肠杆菌快速筛选检测方法——交叉引物恒温扩增结合免疫金标检测方法。方法:针对阪崎肠杆菌16S-23S rDNA间区序列设计特异性引物及探针,建立交叉引物等温扩增法,利用免疫金标试纸条对结果进行检测。用18株阪崎肠杆菌及其他36株近源菌进行特异性试验;通过定量DNA、纯菌液计数、添加干扰菌检测进行灵敏度验证。结果:建立方法具有很好的特异性;增菌液检测灵敏度为10~1CFU/mL,DNA检测灵敏度为10~0fg/test。结论:建立的交叉引物恒温扩增结合免疫金标检测方法特异性好、灵敏度高,不需要复杂仪器,对口岸快速筛查、基层或偏远经济不发达地区顺利开展检测具有实际意义。
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