【摘 要】
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目的 通过构建具有CD44特异性靶向作用的基因载体硫代适体-聚乙二醇-聚酰胺胺(TA-PEG-PAMAM),携带具有抗乳腺癌细胞增殖作用的基因微小RNA(miRNA,miR)-145,观察载体系统的转
【机 构】
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430070武汉,广州军区武汉总医院普通外科572000三亚,解放军第425医院药械科;解放军第425医院药械科,三亚,572000;广州军区武汉总医院普通外科,武汉,430070;
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目的 通过构建具有CD44特异性靶向作用的基因载体硫代适体-聚乙二醇-聚酰胺胺(TA-PEG-PAMAM),携带具有抗乳腺癌细胞增殖作用的基因微小RNA(miRNA,miR)-145,观察载体系统的转染效率及其对乳腺癌细胞侵袭和转移的抑制作用.方法 运用核磁共振(NMR),鉴定TA-PEG-PAMAM基因载体的结构;利用粒径电位仪对TA-PEG-PAMAM/miRNA纳米复合物进行表征;利用基因转染实验观察TA-PEG-PAMAM/miRNA纳米复合物在乳腺癌细胞MDA-MB-231(CD44+)和MCF-7(CD44-)上的表达效果;利用细胞计数试剂盒(CCK-8)细胞增殖抑制实验,观察TA-PEG-PAMA M/miRNA-145对乳腺癌细胞增殖、侵袭和转移的抑制作用.结果 通过结构鉴定确定TA-PEG-PAMAM合成成功.定性定量转染效率实验考察证明,PEG修饰后的PAMAM对乳腺癌细胞转染效率差异无统计学意义(P＞0.05),经TA进一步修饰后对MDA-MB-231细胞转染效率增加,差异有统计学意义(P＜0.05),证明TA的靶向作用.CCK-8细胞增殖实验证明,TA-PEG-PAMAM/miRNA-145纳米复合物的半数抑制浓度(IC50)值[(121.3±14.9)nmol/L]低于阴性对照组[(261.5±30.2)nmol/L],差异有统计学意义(P＜0.05),说明其对乳腺癌细胞增殖、侵袭和转移具有明显的抑制作用.结论 TA-PEG-PAMAM/miRNA-145有望成为今后靶向治疗乳腺癌的基因药物.
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