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原生质体的分离与培养是食用菌原生质体融合工作的重要基础。本文比较了不同溶壁酶组成及浓度、渗透压稳定剂、pH值、反应温度、菌丝培养基成分和菌丝的生理状况等因素对香菇(Lentinus edodes)菌丝原生质体分离的影响。用PDY培养基培养的幼嫩菌丝,在1.0％溶壁酶和1.0％脱壁酶的混合酶液系统中,以0.6M KC1 为渗透压稳定剂,pH5.0,反应4小时可形成10~7/ml以上的原生质体。在再生培养基中加入香菇菌丝提取液可获得较高的原生质体再生率。