应用一步亲和层析法纯化转基因山羊乳腺定位表达的组织型纤维蛋白溶酶原激活剂

来源 :中国兽医学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:geshufa
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对转基因山羊乳腺定位表达的羊奶中组织型纤维蛋白溶酶原激活剂(tPA)的分离纯化方法作了研究,摸索出一种简单可行的纯化方法.羊奶中tPA先经冰乙酸和丙酮沉淀后,再通过Benzamidin Sepharose 6B柱一步亲和层析,纯化倍数达6 714.3倍,比活性188 000 U/mg,活性回收率26%.经SDS-PAGE还原电泳分析,tPA 纯度大于95%,其中低分子双链蛋白占90%以上;Western-blotting检测证实,它和天然tPA 具有相同的抗原性;用纤维蛋白平板法检测,其比活性与天然tPA相近,并且都可被tPA单克隆抗体所抑制.
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