【摘 要】
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为研究传染性法氏囊病病毒(IBDV)感染对鸡细胞模式识别受体(PRRs)及天然免疫抗病毒基因转录的影响,本实验分别采用IBDV弱毒感染DT40细胞和强毒感染SPF鸡,以荧光定量RT-PCR (q
【机 构】
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江苏省农业科学院兽医研究所农业部兽用生物制品工程技术重点实验室/国家兽用生物制品工程技术研究中心,南京农业大学动物医学学院,江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心
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为研究传染性法氏囊病病毒(IBDV)感染对鸡细胞模式识别受体(PRRs)及天然免疫抗病毒基因转录的影响,本实验分别采用IBDV弱毒感染DT40细胞和强毒感染SPF鸡,以荧光定量RT-PCR (qRT-PCR)检测感染细胞和法氏囊组织中PRRs (TLR2、TLR3、TLR4、TLR7、MDA5和LGP2)及天然免疫抗病毒基因(IPS-1、IRF3、PKR、OAS、Mx)的mRNA转录变化.在IBDV感染DT40细胞的2h到24 h内,chMDA5、chTLR3、chLGP2、IRF3、PKR、OAS、Mx的转录水平显著上升,分别为324、22、61、29、16、225 000和18 700倍.当采用siRNA分别敲除DT40细胞中chMDA5、chTLR3和chLGP2时,IPS-1、IRF3、PKR、OAS和Mx在IBDV感染后的2h到24 h差异变化不显著.在IBDV感染SPF鸡法氏囊组织细胞中,chMDA5和chTLR3的表达显著降低,而chLGP2表达无显著差异,IRF3、PKR、OAS和Mx的转录水平显著上升.TLR4和TLR7在IBDV的体外和体内感染试验中均未检测到,而IPS-1在IBDV的体外和体内感染试验中均变化不显著.本实验结果表明,chMDA5、chTLR3和chLGP2在识别IBDV的感染中起着关键作用,IBDV感染严重抑制了PRRS chMDA5和chTLR3的转录,并且提示其抑制作用在体内与体外可能存在不同的分子机制.
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