颈癌细胞增殖和凋亡lncRNA HOXD-AS1通过靶向miR-133a-3p调控PI3K/AKT/mTOR轴影响宫

来源 :山西医科大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:yecao126128
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目的 探究lncRNA HOXD-AS1对宫颈癌细胞的影响及其机制.方法 qRT-PCR检测宫颈上皮细胞和宫颈癌细胞lncRNA HOXD-AS1表达水平.合成lncRNA HOXD-AS1 siRNA(si-HOXD-AS1)及negative control(si-NC)并转染至HeLa细胞.MTT法和流式细胞术检测si-HOXD-AS1组和si-NC组HeLa细胞增殖能力和凋亡水平,Western blot检测Bcl-2、Cyclin D1、Bax、cleaved Caspase-3表达.预测并验证HOXD-AS1与miR-133a-3p靶向结合.在si-HOXD-AS1 HeLa细胞中转染miR-133a-3p in-hibitor(si-HOXD-AS1+miR-133a-3p inhibitor),MTT和流式细胞术检测si-NC组、si-HOXD-AS1组和si-HOXD-AS1+miR-133a-3p inhibitor组HeLa细胞增殖能力和凋亡水平,Western blot检测各组HeLa细胞中PI3K、AKT、mTOR磷酸化水平.结果 相比于宫颈上皮细胞,宫颈癌细胞中lncRNA HOXD-AS1高表达(P<0.001).相比于si-NC组,si-HOXD-AS1组HeLa细胞增殖能力显著下调(P<0.01),细胞凋亡水平显著增加(P<0.001),抑凋亡蛋白Bcl-2和Cyclin D1表达显著下调(P<0.01),促凋亡蛋白Bax、cleaved Caspase-3表达显著增加(P<0.001).lncRNA HOXD-AS1与miR-133a-3p靶向结合.si-HOXD-AS1+miR-133a-3p inhibitor组HeLa细胞增殖能力显著高于si-HOXD-AS1组,细胞凋亡水平显著低于si-HOXD-AS1组.相比于si-NC组,si-HOXD-AS1组HeLa细胞中PI3K、AKT、mTOR磷酸化水平表达显著降低(P<0.01),si-HOXD-AS1+miR-133a-3p inhibitor组HeLa细胞中PI3K、AKT、mTOR磷酸化水平均显著高于si-HOXD-AS1组(P<0.01).结论 lncRNA HOXD-AS1可通过靶向调控miR-133a-3p而调控PI3K/AKT/mTOR信号通路进而影响细胞增殖和凋亡.
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