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目的
建立并优化生产用重组杆状病毒滴度间接免疫荧光检测方法，并进行初步验证。
方法将96孔板贴壁培养的SF9细胞，接种杆状病毒溶液共孵育一定时间后间接免疫荧光法显色。通过对细胞使用浓度、孵育时间及优化显色处理条件(固定液、封闭液、抗体种类及使用条件)，建立杆状病毒滴度间接免疫荧光检测方法，进行特异性、准确性、重复性和中间精密度验证，并与杆状病毒滴度酶联检测试剂盒检测结果进行比较。
结果细胞使用浓度为0.6×106个/ml、共孵育时间为3 d；显色条件优化后确定了冰冻甲醛-丙酮溶液为最适固定溶液和5%的山羊血清封闭液，一抗和二抗稀释比例均为1∶200、37℃温育1 h时显色效果最佳。用该方法检测不同样品，仅杆状病毒组出现特异性荧光斑点。本方法与试剂盒酶联法检测结果趋势相同，其线性相关系数R2＝0.996，表明两种方法具有良好的正相关性；重复性及中间精密度验证结果的变异系数CV均<10%。
结论建立了重组杆状病毒滴度的间接免疫荧光检测方法，该方法具有良好的特异性、准确性、重复性和中间精密度，可用于生产中病毒滴度的检测。