蚂蟥wpHSP90基因的克隆及不同温度下的表达分析

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HSP90是广泛存在的分子伴侣,参与多种细胞行为,在生殖细胞的减数分裂过程中发挥重要作用,但尚不清楚在雌雄同体蚂蟥Whitmania pigra 性腺发育中的作用。为探究HSP90对蚂蟥生殖细胞发育的影响,该研究对蚂蟥wpHSP90基因进行了克隆,生物信息学分析以及表达量测定。结果表明,克隆得到的wpHSP90全长2 592 bp,其中开放阅读框(ORF)长为2 373 bp,编码790个氨基酸。预测wpHSP90蛋白在丝氨酸、苏氨酸和酪氨酸残基上有85个磷酸化修饰位点。结构域预测和多序列比较结果显示,wpHSP90含有HSP90的2个保守结构域,与水蛭Helobdella robusta的同源性最高,序列相似度为80.72%。RT-qPCR结果表明,在12~28 ℃,5月龄蚂蟥性腺中wpHSP90的相对表达量与温度成正相关,其中雌性腺中的表达量明显高于雄性腺,且与精卵巢生殖细胞发育趋势一致。综上,wpHSP90可能参与调控蚂蟥精卵巢生殖细胞的发育,尤其卵细胞的发育。本研究可为蚂蟥性腺发育机制的进一步研究提供参考。
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