枸杞多糖调控Wnt信号通路对子宫肌瘤细胞生物活性的影响

来源 :中国免疫学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:hanwenjun07
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目的:探讨枸杞多糖(LBP)调控Wnt信号通路对子宫肌瘤细胞生物活性的影响。方法:将健康的30只SD大鼠随机分为5组:对照组、模型组、LBP低剂量组、LBP中剂量组和LBP高剂量组,每组6只,造模结束后,低剂量组,中剂量组和高剂量组大鼠分别给予10、50和100 mg/kg LBP灌胃,1次/d,连续14 d,对照组和模型组大鼠相同时间内给予相同剂量的生理盐水灌胃,检测子宫系数。选择10例子宫肌瘤组织进行分离,子宫肌瘤细胞培养至密度为5×107个/ml,将细胞随机分为4组,子宫肌瘤组、低LBP组、中LBP组和高LBP组,后3组子宫肌瘤细胞加入100、200、400μg/ml的LBP,连续干预72 h,采用MTT检测、流式细胞仪、Transwell小室分别检测子宫肌瘤细胞存活率、凋亡率及侵袭数目;采用Western blot及qRT-PCR检测Wnt/β-catenin蛋白及mRNA表达。结果:与对照组相比,模型组大鼠的体质量降低,子宫重量、子宫系数明显提高(P<0.05),与模型组相比,LBP低、中及高剂量组大鼠子宫重量、子宫系数均降低,体质量增加,组间比较差异均有统计学意义(P<0.05);CCK-8检测结果显示:低、中、高LBP组24 h、48 h及72 h组子宫肌瘤存活率均低于子宫肌瘤组(均P<0.05),子宫肌瘤组在24 h、48 h及72 h时差异均无统计学意义(P>0.05),低、中、高LBP组在24 h时细胞存活率差异无统计学意义(P>0.05),其余时间点两两比较子宫肌瘤存活率差异均有统计学意义(均P<0.05);流式细胞仪结果显示:低、中、高LBP组子宫肌瘤凋亡率均高于子宫肌瘤组(均P<0.05),低、中、高LBP组两两相比子宫肌瘤凋亡率差异均有统计学意义(均P<0.05);Transwell小室结果显示:低、中、高LBP组子宫肌瘤细胞侵袭数目均低于子宫肌瘤组(均P<0.05),低、中、高LBP组两两相比子宫肌瘤细胞侵袭数目差异具有统计学意义(均P<0.05);子宫肌瘤组细胞中Wnt5b和β-catenin蛋白/mRNA表达水平低于低、中及高LBP组(均P<0.05),低、中及高LBP组Wnt5b和β-catenin蛋白/mRNA表达逐渐降低,且组间两两比较差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:LBP能够抑制体外培养的子宫肌瘤细胞活性,且LBP浓度与细胞凋亡具有正相关性,其机制与抑制Wnt5b/β-catenin信号通路相关。
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