【摘 要】
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肝癌是临床上一种常见的恶性肿瘤,目前临床上仍缺乏特异有效的诊断标志物。有研究表明,固醇O-酰基转移酶1 (sterol O-acyltransferase 1,SOAT1)作为胆固醇代谢的关键酶,与肝癌的发生发展密切相关。因此,SOAT1在作为肝癌生物标志物方面具有巨大潜力。本研究从肝癌细胞Huh-7中获取SOAT1基因,经原核表达、蛋白质纯化后,以纯化的重组SOAT1蛋白作为抗原免疫小鼠,利用杂
【基金项目】
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湖南省自然科学基金项目(2021JJ70145);
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肝癌是临床上一种常见的恶性肿瘤,目前临床上仍缺乏特异有效的诊断标志物。有研究表明,固醇O-酰基转移酶1 (sterol O-acyltransferase 1,SOAT1)作为胆固醇代谢的关键酶,与肝癌的发生发展密切相关。因此,SOAT1在作为肝癌生物标志物方面具有巨大潜力。本研究从肝癌细胞Huh-7中获取SOAT1基因,经原核表达、蛋白质纯化后,以纯化的重组SOAT1蛋白作为抗原免疫小鼠,利用杂交瘤等技术共获得5株SOAT1单克隆抗体细胞株,分别命名为1F3、1G3、1D6、2F8、4D11,其中4D11能够识别肝癌细胞Huh-7及临床肝癌组织标本中的SOAT1蛋白;最后,将4D11送至生物公司进行测序,获得该抗体可变区的氨基酸序列。本研究利用重组SOAT1蛋白成功制备了抗SOAT1的特异性单克隆抗体,这不仅为后续应用SOAT1蛋白制备肝癌伴随诊断试剂盒提供了原材料,而且还为建立基于SOAT1的肝癌诊断方法奠定了基础。
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