【摘 要】
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目的 构建针对肿瘤相关基因蛋白激酶B1（protein kinase B1，AKT1）、环氧合酶2（cyclooxygenase 2，COX-2）、磷脂酰肌醇-3-激酶调节亚基1（phosphatidylinositol kinase 3 regulatory subunit1，PIK3R1）的小发卡RNA（small hairpin，shRNA）重组腺病毒表达载体，体内外研究其对人胃腺癌SGC7
【机 构】
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天津医科大学总医院消化科,300052,天津医科大学总医院消化科,300052,天津医科大学总医院呼吸科,300052,天津医科大学总医院消化科,300052,神经病学研究所,天津医科大学总医院消化科
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目的 构建针对肿瘤相关基因蛋白激酶B1（protein kinase B1，AKT1）、环氧合酶2（cyclooxygenase 2，COX-2）、磷脂酰肌醇-3-激酶调节亚基1（phosphatidylinositol kinase 3 regulatory subunit1，PIK3R1）的小发卡RNA（small hairpin，shRNA）重组腺病毒表达载体，体内外研究其对人胃腺癌SGC7901细胞增殖的影响，为胃腺癌的联合基因治疗提供参考。方法构建一个编码COX2，AKT1及PIK3R1三条shRNA的重组腺病毒质粒表达载体，包装扩增并鉴定其病毒滴度。在体内外转染SGC7901细胞，检测肿瘤细胞生长情况，蛋白表达和细胞周期变化。结果经酶切分析，测序鉴定表明成功构建并扩增rAd5-C—A—P腺病毒表达载体。转染SGC7901后COX2，AKT1及PIK3R1的mRNA和蛋白的表达水平均明显降低，甲基氮唑蓝（methyl thiazolyltetrazolium，MTT）法显示转染后第6d细胞存活率为27．6％，流式细胞周期显示G0／G1期阻滞，2-D的Matrigel基质生长实验显示rAd5-C—A-P转染组细胞贴壁生长能力明显减低，体内实验中肿瘤生长也明显减慢（P％0．01）。结论靶向COX-2，AKT1和PIK3R1的shRNA技术可以序列特异性地抑制SGC7901细胞的COX-2，AKT1和PIK3R1表达，在体内外对SGC7901细胞增殖产生明显抑制作用。
其他文献
目的 探讨血浆凝血因子Ⅶ(coagulation factorⅦ,FⅦ)水平及其基因多态性在宁夏回、汉族冠心病以及心肌梗死患者中的分布特点.方法 采用候选基因及病例一对照研究的方法,以聚合酶链反应及限制性片段长度多态性技术,对420例回族冠心病患者及508名回族健康者,以及600例汉族冠心病患者和604名汉族健康者行FVH基因的R353Q、-323 0/10 bp和HVR4多态性分析,同时采用重组
先证者(Ⅳ3) 男,22岁,因"反复发作四肢无力6年,再发作1天"入院.患者于6年前出现四肢无力,从下肢向上肢发展,无大小便功能障碍,无肢体麻木,在外院诊断为"低钾性麻痹",补钾后24 h内症状逐渐好转;以后每年均发作,补钾后好转。
患者 男,38岁,汉族,表型、智力正常,无有毒物质接触史,无辐射物质接触史,非近亲结婚,有烟酒嗜好.因其妻2004年2月孕46天,阴道流血2 h,彩超显示胚胎停止发育,后继发不孕而就诊。
目的 对1例临床诊断为慢性粒单核细胞白血病患者进行荧光原位杂交(fluorescence in situhybridization,FISH)研究.方法 将患者骨髓细胞24 h培养后按常规方法制备染色体.采用R显带技术进行染色体核型分析;采用AML1-ETO双色双融合探针、8号和21号整条染色体涂染探针、8号染色体着丝粒探针和21号染色体亚端粒探针分别进行3种FISH分析;应用逆转录聚合酶链反应(
全国第八次医学遗传学学术会议（中华医学会2009年医学遗传学年会）定于2009年7月11日至12日在黑龙江省哈尔滨市召开。本次研讨会经中华医学会批准，列入2009年学术活动计划（医会学术[2009]-Y11-01-63）和国家级继续医学教育项目（项目编号：2009-01-03-008；学分：10）。此次会议由中华医学会医学遗传学分会、中国遗传学会人类和医学遗传学委员会主办。
目的 探讨荧光原位杂交（fluorescence in situ hybridization，FISH）技术在诊断变异Ph易位及Ph（-）慢性髓细胞白血病（chronic myelocytie leukemia，CML）中的应用价值。方法应用常规R显带方法，对9例伴有变异Ph易位和2例Ph（-）CML患者采用双色双融合bcr／abl探针进行FISH检测。结果9例变异Ph易位CML患者异常核型除涉及
患者女,34岁.G3P1+2.第1胎顺产一女孩现已14岁,表型及智力均正常;第2、3胎均于孕50多天不明原因阴道出血,保胎无效,自然流产.取患者外周血进行常规培养、制片、显带.患者核型为46,XX,t(6;15)(6qter→6p23∶∶15q15→15qter;15pter→15q15∶∶6p23→6pter)。
先证者（Ⅲ3）女，23岁，先天性分裂手（分裂足）畸形（splithand／split—foot malformation，SHFM）。曾于2009年孕5月因B超发现胎儿SHFM而引产一男死婴，产后证实为SHFM胎儿。
患者女，32，汉族，结婚7年，闪先后流产6次，来院就诊。第1胎孕60d自述劳累后自然流产；第2胎60余天网感冒行药流；第3胎孕70d不明原因出血，行保胎措施无效后流产；第4～6胎均在孕60余灭不明原因出血，
先证者（Ⅱt）女，57岁。因“头昏、黑朦7年，加重伴心慌、心累、胸闷半月”于2008年5月入院。查体：神志清。心率55次／分，律齐。血电解质、肝。肾功能、X线胸片均正常。心电图示：窦性心律，