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目的
探讨雷帕霉素(RAPA)联合5-氮-2'-脱氧胞苷(5-Aza-dC)对急性白血病Nalm-6细胞增殖和凋亡的影响及其作用机制。
方法培养复苏后的Nalm-6细胞至对数生长期,采用不同浓度的RAPA、5-Aza-dC单药及两药联用处理Nalm-6细胞。CCK-8比色法检测细胞增殖,AnnexinV-PE/7-AAD标记及流式细胞术检测细胞凋亡,Western blot检测细胞TSC2及磷酸化哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)的表达。
结果RAPA及5-Aza-dC均能抑制Nalm-6细胞增殖和诱导Nalm-6细胞凋亡(P< 0.05),RAPA联合5-Aza-dC对Nalm-6细胞的增殖抑制和凋亡诱导具有协同作用(P<0.05)。5-Aza-dC上调Nalm-6细胞的TSC2蛋白表达,RAPA及5-Aza-dC降低mTOR的磷酸化水平,RAPA联合5-Aza-dC可提高对mTOR磷酸化的抑制。
结论RAPA联合5-Aza-dC可增强对Nalm-6细胞增殖的抑制作用及凋亡的诱导作用,作用机制可能是抑制了mTOR的磷酸化。