水牛抑制素α亚基基因的克隆与原核表达

来源 :黑龙江畜牧兽医 | 被引量 : 0次 | 上传用户:mark_johnson
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采用RT—PCR方法从水牛卵巢总RNA中扩增抑制素α亚基基因,并克隆入pMD18-T载体,进行PCR、双酶切及测序鉴定。序列分析结果表明:水牛抑制素仅亚基基因编码序列长为1083bp,编码360个氨基酸,与牛、人、猪抑制素仪亚基基因CDS成熟蛋白氨基酸的同源性分别为96%、80%、87%,表明抑制素α亚基是一组在进化上高度保守的蛋白质。将水牛抑制素α亚基基因CDS克隆到pET-30a表达载体中,转化宿主菌BL21(DE3)进行原核表达。在1mmol/LIPTG中,37℃诱导表达4h后抑制素仪亚基基因重组蛋
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