【摘 要】
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【目的】建立产气荚膜梭菌β毒素抗体间接ELISA检测方法。【方法】将原核表达重组质粒pET-28a-β转化大肠杆菌BL21（DE3）感受态细胞,用IPTG进行诱导表达,表达产物经镍柱亲和层析
【机 构】
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榆林学院生命科学学院,西北农林科技大学动物医学院
【基金项目】
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陕西省科技攻关项目（2015NY162）, 西北农林科技大学试验示范站（基地）科技成果推广项目（TGZX2015-32）
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【目的】建立产气荚膜梭菌β毒素抗体间接ELISA检测方法。【方法】将原核表达重组质粒pET-28a-β转化大肠杆菌BL21（DE3）感受态细胞,用IPTG进行诱导表达,表达产物经镍柱亲和层析纯化、尿素梯度透析复性后进行Western blot鉴定。用复性的β毒素重组蛋白作为包被抗原,通过优化间接ELISA试验条件,建立其抗体间接ELISA检测方法,对该方法的特异性、敏感性和重复性进行考察,并用其对521份临床样本进行检测。【结果】通过诱导、纯化和复性,获得了纯度较高且具有良好反应原性的β毒素重组蛋白。间接
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