【摘 要】
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目的:构建抑制人血管内皮生长因子C(VEGF-C)基因表达的RNA干扰(RNAi)逆转录病毒表达载体pSIREN-VEGF-C。方法:根据GenBank中VEGF-C序列,设计、合成靶向VEGF-C基因、编码短发夹RNA的
【机 构】
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广州医学院病理教研室,广州医学院实验医学研究中心
【基金项目】
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广东省医学科研基金(A2002252),广州市科技局基金项目(2006J1-C0151)
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目的:构建抑制人血管内皮生长因子C(VEGF-C)基因表达的RNA干扰(RNAi)逆转录病毒表达载体pSIREN-VEGF-C。方法:根据GenBank中VEGF-C序列,设计、合成靶向VEGF-C基因、编码短发夹RNA的两条寡核苷酸序列,退火后用T4连接酶与线性化的pSIREN载体连接,转化感受态大肠杆菌,筛选阳性克隆,抽提质粒,获得重组pSIREN-VEGF-C质粒;BglⅡ和EcoRⅠ双酶切、测序鉴定。结果:重组质粒经双酶切,证实插入片段的大小、方向均与设计的一致;测序显示序列完全正确。结论:成功构
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