【摘 要】
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通过RT-PCR体外扩增目的基因胰岛新生相关蛋白（isletneogenesis associated protein,INGAP）,并将其克隆入原核表达载体pET22b（＋）,在大肠杆菌BL21（DE3）中诱导表达。表达的目标蛋白主
【机 构】
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南方医科大学附属南方医院内分泌科,暨南大学第一附属医院临床实验中心,重庆市生物制药工程技术中心第三军医大学临床微生物学及免疫学教研室,第三军医大学附属西南医院麻醉科
【基金项目】
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国家“十五”“863”计划资助项目（2001AA215161）
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通过RT-PCR体外扩增目的基因胰岛新生相关蛋白（isletneogenesis associated protein,INGAP）,并将其克隆入原核表达载体pET22b（＋）,在大肠杆菌BL21（DE3）中诱导表达。表达的目标蛋白主要以包涵体形式存在,洗涤杂蛋白后用尿素溶解,经Heparin Agrose亲合柱层析分离后,再用Superdex75凝胶过滤层析进一步纯化。纯化后的INGAP皮下注射免疫家兔,制备兔抗INGAP血清,采用免疫双扩、ELISA评价INGAP的免疫活性。结果显示INGAP表达量高
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