中蜂囊状幼虫病毒结构蛋白VP2的密码子优化表达及其免疫原性研究

来源 :病毒学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:HUANGKAO2
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
利用生物信息学软件对编码中蜂囊状幼虫病毒(Chinese sacbrood virus,CSBV)VP2结构蛋白的密码子进行优化来提高VP2蛋白表达量,并进行免疫原性研究确定VP2蛋白的免疫原性。通过对17株囊状幼虫病毒(SBV)和7株中蜂囊状幼虫病毒(CSBV)的VP2基因序列进行比对,选取代表毒株(GenBank:HM237361.1)CSBV-LN株VP2基因作为参考序列,并用在CSBV所有毒株中保守性相对较强的氨基酸替换CSBV-LN株VP2对应位置的氨基酸,通过在线软件(http://www.jcat.de/和http://genomes.urv.es/OPTIMIZER/)对其密码子进行优化,构建原核表达质粒pET-28a-optiVP2,并转化入BL21(DE3)中,进行诱导表达。表达产物经SDS-PAGE和Westren blot鉴定正确后,将表达蛋白纯化并免疫至白来杭母鸡,对免疫鸡的抗体水平和淋巴细胞增值指数进行检测,研究CSBV VP2蛋白的免疫原性。同时,收集免疫后鸡蛋制备卵黄抗体,经纯化再与CSBV相互作用后,接种于3日龄蜜蜂幼虫,观察接种后幼虫死亡率,研究卵黄抗体中和CSBV病毒能力。结果显示,优化后的optiVP2能够在大肠杆菌中高效表达,其表达产物具有良好免疫原性,表达产物接种白来杭母鸡可诱导产生抗体,制备的卵黄抗体具有中和CSBV的作用。本实验实现了CSBV结构基因VP2在原核系统的高效表达,鸡免疫实验表明其具有良好免疫原性,并且可诱导鸡产生保护作用中和抗体,为进一步开发防治CSBV的生物制剂提供了帮助。
其他文献
通过对SA08~34柱状沉积物样品的硅藻分析,共鉴定出硅藻165种和变种,隶属45个属.根据硅藻组合特征,结合^14C测年和CaCO3分析结果,进行了柱样地层的划分,讨论了该海域末次冰期以来的沉
【正】 英语中的时态,按照语法书上一般的说法,是谓语动词的一种形式,它表示时间关系,即表示行为或状态发生或存在的时间与说话人用语句把该行为或状态表达出来的时间之间的
《包身工》是高中语文二册教材的首篇课文。作为我国报告文学的典范之作,其无论在现代文学史上,还是在中学语文教材体系中,都有着重要的地位。因而,帮助中学生尽量全面、准确地认
目的总结余江毅教授治疗原发性甲状腺功能亢进症(简称甲亢,Graves’病)的临床经验。方法从Graves’病的病因、抗甲状腺药物治疗(Antithyroid drug,ATD)药理机制及治疗现状、
目的观察化浊解毒方对黄褐斑模型小鼠用药前后角朊细胞中c-myc基因表达的影响。方法采用紫外线照射法造小鼠黄褐斑模型30只,用免疫组化方法检测小鼠模型皮损角朊细胞中c-myc
目的:观察Cdx2及PTEN在胃粘膜病变中的表达.方法:以正常胃粘膜作为对照,用免疫组化的方法检测Cdx2和PTEN在胃粘膜肠上皮化生和肠型胃癌组织中的表达情况.结果:Cdx2在正常胃粘
随着工业的发展,越来越多的机械系统提出了高速、高精度的运动性能要求.特别在半导体制造行业,芯片集成度的不断增大,芯片尺寸的减小,而生产效率要求的不断提高,对设备的加速度、速
随着电子商务活动的蓬勃发展,加快了商品的流通和产业的发展。而物流作为电子商务活动中的重要环节,如何提供良好的服务网点服务,是关系到电子商务活动质量的重要因素。通过
新华社北京11月7日电(记者孙辰茜)外交部新闻发言人陆慷7日在谈到全国人大常委会通过对香港基本法第一百零四条的解释时说,香港事务属于中国内政,任何外国不应干涉。有记者问
期刊
回 回 产卜爹仇贱回——回 日E回。”。回祖 一回“。回干 肉果幻中 N_。NH lP7-ewwe--一”$ MN。W;- __._——————》 砧叫]们羽 制作:陈恬’#陈川个美食 Back to yield