猪干扰素γcDNA的分子克隆与在大肠杆菌中的表达

来源 :农业生物技术学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:yangtianmei
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采用RT-PCR技术从猪脾淋巴细胞总RNA中扩增出猪干扰素γ cDNA(SwIFN-γ2)。SwIFN-γ2与已报道的猪干扰素γ序列基本一致,仅在462位核苷酸处发生了点变异。在SwIFN-γ2成熟蛋白基因两端分别合成含Sph I和Hind Ⅲ酶切位点的引物,用PCR扩增后亚克隆到pQE30表达载体,转化宿主菌SG13009(pREP4),经IPTG诱导表达了N'端含6个组氨酸的重组猪干扰素γ(6His-rSwIFNγ2)。重组干扰素的表达量占总菌体蛋白的33.5%。采用Ni-NTA金属螯合亲和
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