【摘 要】
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目的:构建人鸟氨酸脱羧酶(ODC)基因的RNAi慢病毒载体.方法:根据ODC mRNA序列,选择3个19nts的靶序列,设计并合成包含各正反义靶序列的互补DNA链,退火后插入pSuper载体的H1RNA
【机 构】
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山东大学医学院生物化学与分子生物学研究所,山东大学医学院生物化学与分子生物学研究所,山东大学医学院生物化学与分子生物学研究所,山东大学医学院病理学教研室
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目的:构建人鸟氨酸脱羧酶(ODC)基因的RNAi慢病毒载体.方法:根据ODC mRNA序列,选择3个19nts的靶序列,设计并合成包含各正反义靶序列的互补DNA链,退火后插入pSuper载体的H1RNA启动子后产生pRiODC,将其中的ODC shRNA表达结构酶切插入慢病毒转移质粒pHRCMVGFP,产生pHRiODC/GFP.与△R8.2和pCMVVSVG共转染HEK293T细胞,包装产生慢病毒,分别采用转导HEK293T细胞和ReaI-Time RT-PCR的方法测定慢病毒的功能滴度和病毒RNA分子
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