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目的：探究“调和阴阳”针灸联合穴位按摩对阴阳失调证顽固性失眠症患者焦虑、嗜睡症状和神经递质水平的影响。方法：选取2019年5月～2020年6月于我院就诊的阴阳失调证顽固性失眠症患者126例，采用随机信封法分为观察组（n=63）和对照组（n=63）。对照组给予常规西药治疗，观察组在对照组的基础上予以穴位按摩法联合“调和阴阳”针灸法进行治疗。两组患者均治疗15d。比较其治疗15d后临床疗效，记录两组患者治疗前及治疗15d后中医证候积分、焦虑症状[汉密尔顿焦虑量表（HAMA）、病人健康问卷抑郁量表（PHQ-9）]、嗜睡症状[爱普沃斯嗜睡量表（ESS）、匹兹堡睡眠质量指数（PSQI）]、神经递质水平[5-羟色胺（5-HT）、5-羟吲哚乙酸（5-HIAA）、兴奋性神经递质总量（EAA）、γ-氨基丁酸（GABA）],并记录两组患者治疗期间不良反应发生情况。结果：治疗15d后，观察组临床总有效率（93.7%）明显高于对照组（81.0%）（P＜0.05）。治疗15d后，两组患者中医证候积分、HAMA、PHQ-9、ESS、PSQI评分、EAA水平均较治疗前明显降低，且观察组明显低于对照组（P＜0.05）;治疗15d后，两组患者5-HT、5-HIAA、GABA水平较治疗前明显升高，且观察组明显高于对照组（P＜0.05）;观察组患者治疗期间总不良反应发生率（7.9%）与对照组总不良反应发生率（9.5%）无明显差异（P＞0.05）。结论：“调和阴阳”针灸联合穴位按摩可有效缓解阴阳失调型顽固性失眠症患者临床证候，改善神经递质表达，进而提高其睡眠质量，对降低焦虑及嗜睡程度有积极影响，值得临床应用推广。