固态发酵黑曲霉产壳聚糖酶的纯化及其性质研究

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目的研究黑曲霉产壳聚糖酶的纯化及其性质。方法紫外诱变筛选黑曲霉产壳聚糖酶高产菌株,并分离纯化其固态发酵物的粗提液,研究纯化的壳聚糖酶的酶学性质。结果固态发酵120h,干培养基的酶活力可达58.12U·g-1。固态培养基提取液通过丙酮分级沉淀,经交联壳聚糖树脂亲和层析、DEAE-Sepharose FF层析得到了一种胞外壳聚糖酶,分子量为63kD,最适反应温度为55℃,最适反应pH6~7,降解壳聚糖反应的米氏常数Km为2.933g·L-1,Vmax为0.028g·L-1·min-1。该酶不能降解片状甲壳素和纤维素,能微弱降解CMC和胶体甲壳素,最适底物为脱乙酰度90%的胶体壳聚糖。结论紫外诱变的成本低、方法简单,利用黑曲霉高产壳聚糖酶菌株发酵能生产一种新型壳聚糖酶。
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