抗恙虫病东方体噬菌体抗体库的构建和初步筛选

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目的构建抗恙虫病东方体噬菌体抗体库并进行初步筛选,获得与恙虫病东方体膜抗原特异性结合的抗体克隆.为研制恙虫病的快速诊断试剂盒奠定基础。方法从感染恙虫病东方体小鼠的脾细胞中提取RNA,经逆转录、PCR扩增出抗体轻链和重链基因,将轻链基因和表达载体pComb3进行酶切、连接,转化大肠杆菌XL1-blue,构建轻链库;再对轻链重组质粒和重链Fd基因进行酶切、连接,转化大肠杆菌XL1-blue,构建组合文库.以辅助噬菌体VCS M13进行超感染。用恙虫病东方体56kDa型特异性抗原作为筛选抗原,进行4轮富集筛选后
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