【摘 要】
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目的 探讨护骨素对不同浓度三碘甲酰原氨酸(T3)下人脐静脉内皮细胞凋亡的影响及机制.方法 将内皮细胞分组:对照组(0 nmol/L T3)、低浓度组(0.1 nmol/LT3)、生理浓度组(1 nmo]/LT3)和高浓度组(10 nmol/L T3),护骨素干预48 h后,Hoechst 33258和流式细胞仪检测细胞凋亡情况;Western印迹分析各组细胞磷酸化NF-κB抑制蛋白激酶β(p-Iκ
【机 构】
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430070武汉,广州军区武汉总医院内分泌科,430070武汉,广州军区武汉总医院内分泌科
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目的 探讨护骨素对不同浓度三碘甲酰原氨酸(T3)下人脐静脉内皮细胞凋亡的影响及机制.方法 将内皮细胞分组:对照组(0 nmol/L T3)、低浓度组(0.1 nmol/LT3)、生理浓度组(1 nmo]/LT3)和高浓度组(10 nmol/L T3),护骨素干预48 h后,Hoechst 33258和流式细胞仪检测细胞凋亡情况;Western印迹分析各组细胞磷酸化NF-κB抑制蛋白激酶β(p-IκKβ)、NF-κB抑制蛋白激酶β(IκKβ)、磷酸化结节性硬化复合物2(p-TSC2)、结节性硬化复合物2(TSC2)、磷酸化核糖体蛋白S6激酶(p-S6K)、核糖体蛋白S6激酶(S6K)、磷酸化蛋白激酶B(p-AKT)、蛋白激酶B(AKT)、Bcl-2及Bax表达水平.结果 (1)护骨素干预后的对照组、低浓度组、高浓度组细胞凋亡率低于未干预组(P＜0.05);生理浓度组护骨素干预前后细胞凋亡率无明显差异(P＞0.05).(2)与生理浓度组相比,对照组、低浓度组和高浓度组p-IκKβ、p-S6K、Bax表达显著增高(P＜0.05),p-TSC2、p-AKT、Bcl-2表达显著降低(P＜0.05);经护骨素干预后,对照组、低浓度组、高浓度组p-IκKβ、p-S6K、Bax低于未干预组(P＜0.05),而p-TSC2、p-AKT、Bcl-2表达高于未干预组(P＜0.05);生理浓度组护骨素干预前后上述各蛋白表达无明显差异(P＞0.05).结论 低、高浓度甲状腺激素激活IκKβ/mTOR信号通路引起内皮细胞凋亡,而护骨素抑制其IκKβ/mTOR活性,对内皮细胞具有保护作用。
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