【摘 要】
：
从人脑组织中提取mRNA,通过RT-PCR扩增出目标cDNA,构建蛋白酪氨酸磷酸酶SHP-1-pEASY-E1重组质粒.将重组质粒转化进E.coli TOP10感受态细胞中,筛选阳性克隆进行验证,将测序正
【机 构】
：
河南大学药学院,中国医学科学院北京协和医学院药物研究所国家药物筛选中心
【基金项目】
：
国家自然科学基金资助(No.81273652)
论文部分内容阅读
从人脑组织中提取mRNA,通过RT-PCR扩增出目标cDNA,构建蛋白酪氨酸磷酸酶SHP-1-pEASY-E1重组质粒.将重组质粒转化进E.coli TOP10感受态细胞中,筛选阳性克隆进行验证,将测序正确的质粒转化到E.coli Transetta感受态细胞中表达SHP-1.进一步对SHP-1表达的诱导温度和IPTG浓度等条件进行优化.结果显示,所克隆的SHP-1基因片断经PCR鉴定和测序分析,与目标基因完全相符.通过蛋白表达条件的优化,发现20℃,0.4mmol/L IPTG对表达菌株进行诱导时,SHP-1可溶性蛋白表达量最大.
其他文献
结合某大跨隧道,针对浅埋大跨度隧道进洞的两种典型施工工法微台阶法（也称微台阶法）与双侧壁导坑法进行空间三维数值分析,研究了隧道围岩与结构位移、应力、应变等的分布与发展
本文说明了在铁矿山选矿厂发展提铁降硅技术的重要程度以及其对钢铁工业的重要影响,并且就国外最近使用的铁矿山选铁技术进行了介绍并对其优劣加以探讨,从而指出选矿技术可以
2013年9月和10月,习近平主席先后提出共建“丝绸之路经济带”和“21世纪海上丝绸之路”(简称“一带一路”)倡议;2015年3月,国家发改委、外交部和商务部联合发布《推动共建丝
针对DCS系统外接蜂鸣器声音小、报警级别和部位不易区分,可靠性差等问题,提出了一种基于Nios II的语音报警系统。报警音频将包含报警的详细信息,并预先存放于SD卡中。当警报
内容包括以下几方面：（１） 土地信息系统组成；（２） 土地信息系统设计；（３） 土地信息系统设备配置；（４） 土地信息系统实施；（５） 土地信息系统几个关键技术等。
<正> 1927年春天,由于海森堡提出的“测不准原理”和波尔的“互补原理”,量子力学有了一个自圆其说的解释,这就是“哥本哈根解释”。“测不准原理”是哥本哈根解释”的核心,
招投标作为构建现代市场体系的重要途径,既符合市场经济的竞争原则,还能推动我国社会经济的高速发展。当前,我国工程招投标还存在一些问题,必须加以规范化管理。本文对工程招
笔者近年总结出简易埋针法治疗呃逆症,在临床诊疗当中取得了满意的效果。取膈俞穴及耳穴耳中(膈)、胃埋针治疗呃逆症24例,症状消失21例,症状缓解1例,无效2例。该方法简便易行
通过设计引物,利用RT-PCR从人肝癌细胞(huh-7)中克隆蛋白酪氨酸磷酸酶(PTP1B)全长及功能域PTPc的cDNA序列并连接到pGEM-T Vector载体上,测序正确的cDNA序列连接到表达载体pET
上市公司的财务状况和经营成果已经成为各方面投资者关心的主要问题。合理的分析企业的盈利能力,从而使企业创造出更多的利润,提高自己的盈利能力,成为经营者最为关注的问题