猪脑来源糖胺聚糖的分离纯化及精细组成分析

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目的:从猪脑中提取分离糖胺聚糖(glycosaminoglycans,GAGs),并进行精细结构分析。方法:猪脑组织经脱脂、蛋白酶酶解后,经氯代十六烷基吡啶(CPC)富集,乙醇沉淀获得糖胺聚糖粗品。利用Q-Sepharose Fast Flow离子交换柱纯化,获得7个组分(P1~P7)。所得分级样品分别经肝素裂解酶与硫酸软骨素裂解酶酶解,2-氨基吖啶酮(AMAC)荧光标记后,利用液质联用方法分析其精细结构。结果:猪脑GAGs粗品中主要获得硫酸乙酰肝素(heparan sulfate,HS)、硫酸软骨素(chondroitin sulfate,CS)和少量透明质酸(hyaluronic acid,HA),含量分别为307,293和18 mg·kg-1。P2~P4组分GAGs含量较少; P5~P7组分CS和HS含量相当,CS中以ΔUA-GalNAc4S为主; HS组成以ΔUA-GlcNAc为主,电荷密度略低,未获得肝素组分。结论:基于液质联用技术分析猪脑组织的精细结构,为动物来源糖胺聚糖的研究提供依据。
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