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[摘要] 山东省高密市姜庄镇镇伊家长村伊文星所养肉鸡出现了严重的慢性呼吸道疾病,其中2、3、6棚尤其严重。从患病鸡只的外观和剖检症状推断为支原体疾病,通过从病鸡中分离病原微生物,进而进行分离培养和显微镜检查,鸡胚的接种、全血凝集实验,最后确认为禽的支原体疾病。通过药敏实验,选择了合适的药物进行治疗,有效的控制了疫情的发展和传播,同时也加深了自己对鸡的慢性呼吸道疾病的感性认识和理性认识。
[关键词] 支原体疾病;药敏实验;抑菌直径
一、病原
支原体是一种介于细菌和病毒之间的原核生物,在具有自体繁殖和合成自身大分子的微生物中,体积最小,结构也最简单。支原体主要靠寄生生存,寄生于各种动物的体内。鸡的支原体主要有败血支原体(Mycoplasmaga1lisepticum,MG)和滑液囊支原体(Mycoplasma synoviae,MS),另外还有其他致病力较低的支原体如火鸡支原体、雏鸡支原体和禽支原体等。鸡支原体病的病原体是禽败血霉形体,属于霉形体目霉形体科霉形体属的一个致病种。一般呈细小球杆状或卵圆形,大小约为0.25~0.5um,姬姆萨染色着色良好,革兰氏染色呈弱阴性。
二、流行病史
鸡对本病易感,病鸡和隐性感染鸡是本病的传染源,本病既可以垂直传播又可以水平传播。病原体可以通过鸡咳嗽,喷嚏的飞沫和尘埃经呼吸道传染,被支原体污染的水,饲料,用具也能使本病有一个鸡群传至另一个鸡群。垂直传播可构成代代相传,使本病在鸡群中连续不断的发生。本病在鸡群中传播较为缓慢,但在新发病的鸡群中传播较快。
三、临床症状
病鸡初期呈现精神不振,食欲减退或不食,腹泻,鼻液增多,流浆液性鼻液,部分病鸡鼻孔周围和颈部羽毛沾污明显,鼻孔堵塞,妨碍呼吸,频频摇头或发出奇声。如鼻甲骨或气管粘膜发炎时,分泌液增多,呼吸困难,打喷嚏。严重时,病鸡呼吸困难伸颈张口喘,呼吸是发出罗音,咳嗽。有时病初流泪,继而眼睑肿胀,眼睑上下粘合,甚至失明。全身症状表现为体温升高,生长发育迟缓,逐渐消瘦。
四、病理变化
单纯感染败血支原体的病例,可见轻度的鼻和眶下窦炎。自然感染的病例多为混合感染,可见到呼吸翻膜水肿,充血,肥厚,窦腔内充满粘液和干酪样渗出物。早期气囊轻度浑浊,外观呈灰白色,水肿,表层有增生的结节状病灶。病情严重时,气囊增厚,囊腔内含有大量干酪样渗出物。眶下窦粘膜发炎,窦腔内积有混浊粘液或干酪样渗出物,眶下窦勤膜充血肿胀。病理组织学可见被侵害的组织的勃膜显著增厚,有单核细胞浸润。该病菌容易产生抗药性,而且各地的血清型和流行情况不一样,结合实践,我们做了药敏实验。
五、实验室诊断
1.病料:伊文星的患病鸡
在无菌情况下,取有典型症状的鸡只的支气管中下部的渗出液,加液体培养基磨碎制成悬液,接种于液体培养基,放于27摄氏度的恒温箱中培养5d。
2.镜检
将接种环在酒精灯上火焰消毒,然后粘取鸡的呼吸道下部的渗出液体,均匀的涂抹在玻璃片上,待其自然干燥或在酒精灯上晃动使液体干燥,然后放于过滤盆的两条玻璃棒上,用滴管吸取姬姆萨染色液滴于玻璃片上5min后,倾斜玻璃片倒掉姬姆萨染色液,再在玻璃片上滴上相同剂量的酒精,3min后,用生理盐水冲洗掉残留的染色液,冲洗干净后,自然风干或用滤纸吸千水分,放于显微镜下观察。
3.鸡胚的接种
取病鸡的呼吸道无细菌污染的渗出液经卵黄囊接种于7日龄鸡胚。接种在24h以内死亡的鸡胚为细菌感染死亡;如果是霉形体,在5~7d可以引起鸡胚的死亡,可见到鸡胚的呼吸道有干酪样的渗出物,关节脓肿,肝和脾肿大,心包炎,或全身水肿和肝脏坏死等症状。多次继代后,死亡更加有规律且病变更明显。
4.药敏学实验
将红霉素,强力霉素,链霉素,庆大霉素,氯霉素,丁胺卡那霉素,新霉素,环丙沙星,葱诺沙星的注射液10倍稀释,取直径大约5mm的无菌滤纸片分别浸泡于上述溶液中,制成药敏滤纸片,再将这些药敏滤纸片分别置于有鸡血清的琼脂培养基中,放于37摄氏度的恒温箱中培养24h。多次重复试验,观察抑菌直径,选用合适药物。判定标准:抑菌圈直径6mm以下为不敏感,9mm为低敏感,10~15mm为中敏感,16mm以上为高敏感。
六、试验结果
1.细菌的分离与培养
可见到菌落,典型的菌落呈圆形,微小,透明如露滴状。在40倍光学显微镜下观察时,表面光泽闪光,如玻璃珠样,菌落中心常深埋于培养基中,呈致密的圆形的突起,周围环绕以透明的Him边,陈旧后中心突起部分变为淡黄色乃至棕黄色。
2.显徽镜观察
大部分呈球状,但还有的呈丝状,螺旋状等不规则形态。小球状是基本形态,直径大约为125N250nm,姬姆萨染色良好呈淡紫色。血液滴入抗原中,如果蓝紫色凝块的为阳性;仅在液滴边缘部分出现蓝紫色带,或超过2min仅在边缘部分出现颗粒状物,一可判为可疑;经过2min液滴无变化的为瘾性。
通过了解观察鸡支原体的高发时期一般为4~7周龄,此时鸡生长发育很快,对营养的需求造成鸡只的抵抗力有所下降,加之饲养环境不好,此时鸡容易得病。在饲养过程中,天气的变化,昼夜的温度差异很大,另外雨天也是细菌和病毒长发的时期,这些都是造成鸡支原体爆发的很重要的因素。实践证明,支原体和大肠杆菌常常同时爆发,此时更容易造成鸡只的死亡。结合对支原体的诊断和药敏试验,还有临床的实践,我们采用了强力霉素和环丙沙星饮水治疗,同时加入了一些抗病毒的中药。一个疗程以后,鸡只的死亡率明显的下降,采食量增加,支原体和大肠杆菌得到了有效的控制。通过对支原体的临床症状的观察,还有细菌的分离培养鉴定,自己对鸡的支原体病有了一个全面的认识,为以后的学习和工作奠定了基础,同时对于药物的选择和应用也有了进一步的认识,对疫病的流行和传播的控制有了更大的把握。
[关键词] 支原体疾病;药敏实验;抑菌直径
一、病原
支原体是一种介于细菌和病毒之间的原核生物,在具有自体繁殖和合成自身大分子的微生物中,体积最小,结构也最简单。支原体主要靠寄生生存,寄生于各种动物的体内。鸡的支原体主要有败血支原体(Mycoplasmaga1lisepticum,MG)和滑液囊支原体(Mycoplasma synoviae,MS),另外还有其他致病力较低的支原体如火鸡支原体、雏鸡支原体和禽支原体等。鸡支原体病的病原体是禽败血霉形体,属于霉形体目霉形体科霉形体属的一个致病种。一般呈细小球杆状或卵圆形,大小约为0.25~0.5um,姬姆萨染色着色良好,革兰氏染色呈弱阴性。
二、流行病史
鸡对本病易感,病鸡和隐性感染鸡是本病的传染源,本病既可以垂直传播又可以水平传播。病原体可以通过鸡咳嗽,喷嚏的飞沫和尘埃经呼吸道传染,被支原体污染的水,饲料,用具也能使本病有一个鸡群传至另一个鸡群。垂直传播可构成代代相传,使本病在鸡群中连续不断的发生。本病在鸡群中传播较为缓慢,但在新发病的鸡群中传播较快。
三、临床症状
病鸡初期呈现精神不振,食欲减退或不食,腹泻,鼻液增多,流浆液性鼻液,部分病鸡鼻孔周围和颈部羽毛沾污明显,鼻孔堵塞,妨碍呼吸,频频摇头或发出奇声。如鼻甲骨或气管粘膜发炎时,分泌液增多,呼吸困难,打喷嚏。严重时,病鸡呼吸困难伸颈张口喘,呼吸是发出罗音,咳嗽。有时病初流泪,继而眼睑肿胀,眼睑上下粘合,甚至失明。全身症状表现为体温升高,生长发育迟缓,逐渐消瘦。
四、病理变化
单纯感染败血支原体的病例,可见轻度的鼻和眶下窦炎。自然感染的病例多为混合感染,可见到呼吸翻膜水肿,充血,肥厚,窦腔内充满粘液和干酪样渗出物。早期气囊轻度浑浊,外观呈灰白色,水肿,表层有增生的结节状病灶。病情严重时,气囊增厚,囊腔内含有大量干酪样渗出物。眶下窦粘膜发炎,窦腔内积有混浊粘液或干酪样渗出物,眶下窦勤膜充血肿胀。病理组织学可见被侵害的组织的勃膜显著增厚,有单核细胞浸润。该病菌容易产生抗药性,而且各地的血清型和流行情况不一样,结合实践,我们做了药敏实验。
五、实验室诊断
1.病料:伊文星的患病鸡
在无菌情况下,取有典型症状的鸡只的支气管中下部的渗出液,加液体培养基磨碎制成悬液,接种于液体培养基,放于27摄氏度的恒温箱中培养5d。
2.镜检
将接种环在酒精灯上火焰消毒,然后粘取鸡的呼吸道下部的渗出液体,均匀的涂抹在玻璃片上,待其自然干燥或在酒精灯上晃动使液体干燥,然后放于过滤盆的两条玻璃棒上,用滴管吸取姬姆萨染色液滴于玻璃片上5min后,倾斜玻璃片倒掉姬姆萨染色液,再在玻璃片上滴上相同剂量的酒精,3min后,用生理盐水冲洗掉残留的染色液,冲洗干净后,自然风干或用滤纸吸千水分,放于显微镜下观察。
3.鸡胚的接种
取病鸡的呼吸道无细菌污染的渗出液经卵黄囊接种于7日龄鸡胚。接种在24h以内死亡的鸡胚为细菌感染死亡;如果是霉形体,在5~7d可以引起鸡胚的死亡,可见到鸡胚的呼吸道有干酪样的渗出物,关节脓肿,肝和脾肿大,心包炎,或全身水肿和肝脏坏死等症状。多次继代后,死亡更加有规律且病变更明显。
4.药敏学实验
将红霉素,强力霉素,链霉素,庆大霉素,氯霉素,丁胺卡那霉素,新霉素,环丙沙星,葱诺沙星的注射液10倍稀释,取直径大约5mm的无菌滤纸片分别浸泡于上述溶液中,制成药敏滤纸片,再将这些药敏滤纸片分别置于有鸡血清的琼脂培养基中,放于37摄氏度的恒温箱中培养24h。多次重复试验,观察抑菌直径,选用合适药物。判定标准:抑菌圈直径6mm以下为不敏感,9mm为低敏感,10~15mm为中敏感,16mm以上为高敏感。
六、试验结果
1.细菌的分离与培养
可见到菌落,典型的菌落呈圆形,微小,透明如露滴状。在40倍光学显微镜下观察时,表面光泽闪光,如玻璃珠样,菌落中心常深埋于培养基中,呈致密的圆形的突起,周围环绕以透明的Him边,陈旧后中心突起部分变为淡黄色乃至棕黄色。
2.显徽镜观察
大部分呈球状,但还有的呈丝状,螺旋状等不规则形态。小球状是基本形态,直径大约为125N250nm,姬姆萨染色良好呈淡紫色。血液滴入抗原中,如果蓝紫色凝块的为阳性;仅在液滴边缘部分出现蓝紫色带,或超过2min仅在边缘部分出现颗粒状物,一可判为可疑;经过2min液滴无变化的为瘾性。
通过了解观察鸡支原体的高发时期一般为4~7周龄,此时鸡生长发育很快,对营养的需求造成鸡只的抵抗力有所下降,加之饲养环境不好,此时鸡容易得病。在饲养过程中,天气的变化,昼夜的温度差异很大,另外雨天也是细菌和病毒长发的时期,这些都是造成鸡支原体爆发的很重要的因素。实践证明,支原体和大肠杆菌常常同时爆发,此时更容易造成鸡只的死亡。结合对支原体的诊断和药敏试验,还有临床的实践,我们采用了强力霉素和环丙沙星饮水治疗,同时加入了一些抗病毒的中药。一个疗程以后,鸡只的死亡率明显的下降,采食量增加,支原体和大肠杆菌得到了有效的控制。通过对支原体的临床症状的观察,还有细菌的分离培养鉴定,自己对鸡的支原体病有了一个全面的认识,为以后的学习和工作奠定了基础,同时对于药物的选择和应用也有了进一步的认识,对疫病的流行和传播的控制有了更大的把握。