【摘 要】
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背景诱导去分化软骨细胞重新表达Ⅱ型胶原主要基于软琼脂悬浮培养法。目的用离心管聚集体培养(aggregateculture)诱导去分化转化人关节细胞的Ⅱ型胶原。设计非随机非对照实验
【机 构】
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解放军第三军医大学西南医院骨科,解放军第三军医大学西南医院骨科,解放军第三军医大学西南医院骨科 重庆市400038,重庆市400038,重庆市400038
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背景诱导去分化软骨细胞重新表达Ⅱ型胶原主要基于软琼脂悬浮培养法。目的用离心管聚集体培养(aggregateculture)诱导去分化转化人关节细胞的Ⅱ型胶原。设计非随机非对照实验研究。地点和对象实验在第三军医大学西南医院骨科完成,对象为转化人关节软骨细胞,美国Hyclone公司产品。干预将体外长期培养的第30,40,50代去分化转化软骨细胞消化后进行离心管培养,比较细胞在单层培养、离心管聚集体培养,以及在普通培养基,BAI诱导培养基下[2型骨形态发生蛋白(BMP-2)+抗坏血酸盐+胰岛素],Ⅰ,Ⅱ,Ⅲ型胶原的表达和胞外基质产生情况。主要观察指标Ⅰ,Ⅱ,Ⅲ型胶原的免疫组化染色,Ⅱ型胶原的mRNA表达。结果在单层培养条件下,去分化转化软骨细胞只表达Ⅰ型胶原,而在BAI诱导培养基及离心管聚集体培养下该转化软骨细胞表达丰富的Ⅱ型胶原和大量胞外基质。结论离心管聚集体培养和BAI诱导培养基是诱导去分化转化软骨细胞Ⅱ型胶原的有效方式。
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