应用载体介导的RNAi技术抑制HCMV的UL49基因表达

来源 :中国生物工程杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户：icetqq

【摘要】

：

为了研究RNA干涉抑制HCMV UL49基因的作用,以pLXSN(U6启动子)为模板通过两步PCR的方法扩增含U6启动子的siRNA表达片段,并通过TA克隆将siRNA表达片段克隆到pMD18-T载体构建成s

【作者】

：

曾志锋李月琴唐冬生张欣王莹郭芬周天鸿

【机构】

：

暨南大学生命科学技术学院

【出处】

：

中国生物工程杂志

【发表日期】

：

2005年1期

【关键词】

：

RNAI技术 RNA干涉技术人巨细胞病毒 UL49基因基因表达基因沉默治疗药物载体介导 Vector-Based RNAi HCMV UL49

【基金项目】

：

国家自然科学基金，广东省自然科学基金，广东省自然科学基金

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为了研究RNA干涉抑制HCMV UL49基因的作用,以pLXSN(U6启动子)为模板通过两步PCR的方法扩增含U6启动子的siRNA表达片段,并通过TA克隆将siRNA表达片段克隆到pMD18-T载体构建成siRNA表达质粒,同时以人巨细胞病毒AD169病毒株基因组为模板PCR扩增UL49基因,将其克隆到pEGFP-N1构建融合质粒pEGFP-UL49.通过脂质体介导将siRNA表达质粒和pEGFP-UL49质粒共转染人宫颈癌细胞系HeLa,在荧光显微镜下观察RNA干涉结果.通过这种方法得到具有介导RNA

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