【摘 要】
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目的 观察大鼠阴茎海绵体肌源性干细胞(MDSCs)在成脂诱导培养基作用下向脂肪细胞分化的潜能.方法 采用Preplate差速贴壁法结合密度梯度离心法分离、纯化大鼠阴茎海绵体MDSCs,获得差速贴壁细胞(PP1、PP6细胞);免疫荧光细胞化学法检测PP1、PP6细胞表达干细胞抗原-1(Sca-1)的情况,并传代培养.取PP6第3代细胞在成脂诱导分化培养基中培养21 d,同时对照组采用干细胞培养基培养
【机 构】
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目的 观察大鼠阴茎海绵体肌源性干细胞(MDSCs)在成脂诱导培养基作用下向脂肪细胞分化的潜能.方法 采用Preplate差速贴壁法结合密度梯度离心法分离、纯化大鼠阴茎海绵体MDSCs,获得差速贴壁细胞(PP1、PP6细胞);免疫荧光细胞化学法检测PP1、PP6细胞表达干细胞抗原-1(Sca-1)的情况,并传代培养.取PP6第3代细胞在成脂诱导分化培养基中培养21 d,同时对照组采用干细胞培养基培养;分别于诱导0、7、14、21 d通过油红O染色,观察是否有脂滴形成.结果 PP6细胞表达MDSCs标志物Sca-1,而PP1细胞几乎不表达Sca-1.诱导前3d可见细胞的形状由长梭形变为圆形或者三角形,排列紧密,呈叠瓦样,细胞核清晰,细胞分裂增殖速度明显减慢,油红O染色两组均未见细胞染红;7d左右在相差显微镜下可观察到胞质内有少量的高折光性小脂滴出现,大小均匀,主要集中在细胞核周围,油红O染成红色;14 d左右细胞内脂滴逐渐增多并融合成大脂滴,细胞核被挤到一边或者消失;诱导21d细胞分化达高峰,细胞体积达到最大,胞质内脂滴数量最多,继续诱导,细胞内未见空泡增多.而对照组细胞形态未发生变化,且油红O染色阴性.结论 大鼠阴茎海绵体MDSCs具有向脂肪细胞分化的潜能,从而进一步完善了阴茎海绵体MDSCs多向分化潜能的鉴定。
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