兔肝、肠碱性磷酸酶的提纯和鉴定

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作者应用正丁醇抽提和DEAE-纤维素离子交换、NaCl线性梯度洗脱方法从家兔肝脏和小肠粘膜组织中提取出肝型碱性磷酸酶(L-ALP)和小肠型碱性磷酸酶(I-ALP).抑制试验表明,EDTA对I-ALP和L-ALP均有显著抑制作用,抑制率分别为46.7%和64.3%,二者相差不显著.L-苯丙氨酸对I-ALP有特异性抑制作用(P<0.01),而左旋咪唑对L-ALP有特异性抑制作用(P<0.05).热稳定性分析表明,L-ALP能耐受56℃20 min,I-ALP对热较敏感.经测定L-ALP和I-ALP的Km值分别为4.2×10-4mol/L和1.3×10-3mol/L.园盘聚丙烯酰胺凝胶电泳结果表明,L-ALP和I-ALP酶染色带谱差异显著,前者主要呈两条带,而后者可见四条带.
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