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CP4-EPSPS夹心ELISA配对单克隆抗体的研制和生物学特性分析

来源 :生物技术通报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：hy_mon

【摘 要】

：

为获得能够用于夹心ELISA检测的配对抗CP4．EPSPS蛋白单克隆抗体，构建CP4-EPSPS原核表达载体并转化大肠杆菌Rossetta，获得高效表达。通过对可溶性蛋白纯化，获得了高纯度目的蛋白。

【作 者】

：

李忠鹏 于寒松 胡耀辉 时圣凤 刘蕴慧 段永杰 李小宇 王永 

【机 构】

：

吉林农业大学,吉林省农业科学院,东北农业大学,哈尔滨师范大学

【出 处】

：

生物技术通报

【发表日期】

：

2013年4期

【关键词】

：

CP4-EPSPS 蛋白表达 单克隆抗体 夹心ELISA CP4-EPSPS  Protein expression  Monoclonal antibody 

【基金项目】

：

农业部转基因重大专项（2011ZX08004.004）,中青年科技领军人才及优秀创新团队项目（20121812）,吉林省农业微生物重点实验室平台建设项目（20122105）

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为获得能够用于夹心ELISA检测的配对抗CP4．EPSPS蛋白单克隆抗体，构建CP4-EPSPS原核表达载体并转化大肠杆菌Rossetta，获得高效表达。通过对可溶性蛋白纯化，获得了高纯度目的蛋白。以纯化后的CP4-EPSPS蛋白作为抗原免疫BALB／c小鼠，经过细胞融合和筛选获得2株抗CP4-EPSPS蛋白单克隆抗体（1A5和8A3）。经鉴定，这2株抗体可以有效地识别高温变性和天然CP4-EPSPS蛋白；叠加ELISA分析表明两株抗体识别的抗原表位不同，说明两株抗体能够用于夹心ELISA检测CP4-EP

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