氢饱和生理盐水对急性坏死性胰腺炎大鼠肝损伤的治疗作用及其机制

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目的 探讨氢饱和生理盐水(HRS)对急性坏死性胰腺炎(ANP)肝损伤的治疗作用及其可能机制.方法 将72只雄性Wistar大鼠随机(随机数字法)分为假手术(SO)组、ANP组和HRS组,每组24只.采用胆胰管逆行注射5%牛磺胆酸钠方法制备ANP模型.HRS组在造模成功后5 min尾静脉注射HRS 6 ml/kg体质量,并皮下注射HRS 20 ml/kg体质量补液.SO组大鼠开腹后仅翻动十二指肠和胰腺后关腹.SO组和ANP组大鼠在术后5 min经尾静脉注射生理盐水(6ml/kg体质量),并皮下注射生理盐水(20 ml/kg体质量)补液.术后3、12、24 h分批处死大鼠,心脏取血检测血清淀粉酶(AMY)、谷丙转氨酶(ALT)及谷草转氨酶(AST)水平.取胰头及肝左叶组织行病理检查并评分/分级.免疫组织化学法检测各组大鼠肝脏组织中c-jun氨基端激酶(JNK)、磷酸化c-jun氨基端激酶(p-JNK)蛋白的表达.脱氧核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记(TUNEL)法检测肝脏细胞凋亡.结果 ANP组各时间点的AMY、ALT、AST、胰腺及肝脏病理评分/分级均较SO组大鼠显著升高(P <0.05);HRS组相应指标数值较ANP组均显著下降,但仍显著高于SO组(P<0.05).ANP组12h大鼠肝脏细胞胞质中JNK大量表达,p-JNK广泛表达于肝细胞的胞质及细胞核内;HRS组对应时间点大鼠肝细胞内JNK、p-JNK表达显著低于ANP组(P<0.05).ANP组12h点大鼠肝脏组织凋亡细胞在总细胞的所占比例[(68.78±5.63)%]与SO组[(15.46±5.32)%]比较显著升高(t=19.472,P<0.05),HRS组大鼠肝脏凋亡细胞比例[(36.99±7.42)%]与ANP组比较显著降低(t=-9.65,P<0.05).结论 HRS对ANP大鼠肝损伤具有显著治疗作用,这种作用可能是通过降低JNK表达及磷酸化水平,进而减少肝细胞凋亡来实现的.
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