探讨微小RNA-182-5p(miR-182-5p)靶向叉头蛋白O3a(FOXO3a)对非小细胞肺癌(NSCLC)A549细胞增殖及凋亡的影响。
方法比较人正常肺上皮细胞BEAS-2B、NSCLC细胞A549中miR-182-5p的表达差异。选取A549细胞进行转染，分为miR-182-5p mimic组(转染miR-182-5p mimic)、miR-182-5p inhibitor组(转染miR-182-5p inhibitor)、NC mimic组(转染negative control mimic)和NC inhibitor组(转染negative control inhibitor)。采用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测miR-182-5p表达，Western blotting检测FOXO3a蛋白表达，四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测细胞增殖活性，流式细胞术检测细胞凋亡。双荧光素酶实验验证miR-182-5p与FOXO3a的靶向关系。
结果A549细胞和BEAS-2B细胞中miR-182-5p相对表达量分别为3.21±0.24、1.01±0.11，差异具有统计学意义(t＝14.209，P<0.001)。NC mimic组、miR-182-5p mimic组、NC inhibitor组和miR-182-5p inhibitor组中miR-182-5p相对表达量分别为1.09±0.20、12.80±1.10、1.03±0.11、0.47±0.08，组间差异具有统计学意义(F＝87.872，P<0.001)；上述4组的FOXO3a相对表达量分别为118.34±16.71、50.89±11.58、125.33±20.87、289.26±34.51，组间差异具有统计学意义(F＝62.125，P<0.001)；4组72 h细胞增殖活性分别为1.12±0.13、1.70±0.14、1.07±0.13、0.71±0.11，组间差异具有统计学意义(F＝31.336，P<0.001)，miR-182-5p mimic组细胞增殖活性较NC mimic组显著升高(P<0.05)，miR-182-5p inhibitor组细胞增殖活性较NC inhibitor组显著降低(P<0.05)；4组细胞凋亡率分别为(5.51±1.80)%、(1.41±0.50)%、(6.24±1.71)%、(47.93±5.12)%，组间差异具有统计学意义(F＝211.081，P<0.001)，miR-182-5p mimic组细胞凋亡率较NC mimic组显著降低(P<0.05)，miR-182-5p inhibitor组细胞凋亡率较NC inhibitor组显著升高(P<0.001)。miRNA靶基因预测软件预测miR-182-5p能作用于FOXO3a 3′非翻译区。与转染NC mimic相比较，共转染miR-182-5p mimic与FOXO3a-Wt后A549荧光素酶活性显著降低(1.20±0.14∶0.62±0.10，t＝5.839，P＝0.004)。
结论miR-182-5p可通过靶向FOXO3a促进A549细胞增殖，并抑制细胞凋亡。