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【摘 要】目的：评价萆苓痛风方对急性痛风性关节炎的抗炎镇痛作用及对血白细胞、血尿酸、血肌酐等的影响。方法：将70只雄性健康Wister大鼠随机分为模型组（A）、萆苓痛风方低剂量组（B）、萆苓痛风方中剂量组（C）、萆苓痛风方高剂量组（D）、别嘌呤醇组（E）、吲哚美辛组（F）、空白对照组（G）共7组，每组10只。观察不同时间点大鼠右侧踝关节周径、步态，治疗结束后测定血液中白细胞、尿酸、肌酐等的含量。结果：A组以造模后24 h踝关节肿胀最为严重；B、C、D、E组以造模后6 h踝关节肿胀最为严重，说明药物能减轻该模型的关节肿胀度； C组优于B组，C组与D组、E组疗效无明显差异（P<0.05），F组疗效优于C组、D组与E组；B、C、D、F组均能减轻大鼠的急性关节炎症，改善其步态； D组能减轻大鼠的急性炎症反应，效果优于其它组；C组降血尿酸作用优于B、D、F组，与E组相当；各组对血肌酐均无明显影响； A组可见滑膜下层大量中性粒细胞及淋巴细胞浸润； D组可见滑膜细胞不同程度增生，滑膜下层粘液变性，间质中性粒细胞减少甚至消失，可见散在淋巴细胞及浆细胞浸润。结论：中药萆苓痛风方对大鼠痛风性关节炎具有抗炎镇痛、降低血清中尿酸含量的作用，可用于急性痛风性关节炎的治疗，以C组效果最好。
【关键词】 关节炎，急性痛风性；中药治疗；萆苓痛风方；实验研究；动物；大鼠；尿酸
痛风性关节炎是由于长期嘌呤代谢紊乱，血尿酸增高，导致尿酸盐结晶沉积在关节及关节周围组织，造成白细胞趋化而产生的急性炎症反应所致的一种疾病。主要表现为反复发作的关节红、肿、热、痛及痛风石的形成，严重者可导致关节畸形和功能障碍，属于祖国医学痹病、痛风、历节病等范畴。李景良教授运用萆苓痛风方治疗急性痛风性关节炎数10年，疗效较好，为更客观地评价其疗效，笔者进行了本次动物实验研究，现将研究结果总结报告如下。
1 实验材料
1.1 实验动物 健康雄性Wister大鼠70只，体重为303.15±24.464 g，动物许可证号为SCXK鲁2008002，由郑州大学医学院动物实验中心采购提供。
1.2 实验药物 萆苓痛风方浓缩药液由河南大学淮河医院煎药房提供。主要由川萆薢20 g、土茯苓15 g、忍冬藤20 g、炒苍术10 g、薏苡仁30 g、川牛膝15 g、黄柏10 g、金钱草30 g、汉防己10 g、泽兰10 g、赤芍20 g、山慈菇20 g、白芍30 g等组成。吲哚美辛片（山西临汾制药厂生产，批号为010325）。别嘌呤醇片（广州市市桥制药厂生产，批号为011101）。尿酸（中国医药集团上海化学试剂公司进口分装，批号为0001210）。尿酸钠溶液参照Coderre氏等的方法制备，由河南大学淮河医院免疫室提供。
2 方 法
2.1 动物分组与造模方法 将70只雄性健康Wister大鼠随机分为模型组（A组）、萆苓痛风方低剂量组（B组）、萆苓痛风方中剂量组（C组）、萆苓痛风方高剂量组（D组）、别嘌呤醇组（E组）、吲哚美辛组（F组）、空白对照组（G组）7组，每组10只。A、G组每次灌服灭菌注射用水10 ml·kg-1，B、C、D组每次分别灌服浓度比例为1/4∶1∶4的萆苓痛风方浓缩药液10 ml·kg-1，E组每次灌服别嘌呤醇药液10.4 mg·kg-1，F组每次灌服吲哚美辛溶液7.8 mg·kg-1，各组均为每天1次，连用5天。并于第3天第1次用药后1 h将尿酸钠溶液0.2 ml注入到前6组大鼠右侧踝关节腔内。7组均自由饮食与饮水，不控制其入水量。
2.2 观察指标与观察方法 ①对造模后的急性痛风性关节炎模型鼠继续喂药，48 h后观察其步态变化。步态分级按Coerre介绍的方法进行，0级正常行走；I级为轻微跛行，受试下肢略有弯曲；Ⅱ级为中度跛行，受试下肢只能触及地面而不能受力；Ⅲ级为重度跛行，受试下肢弯曲离开地面，三足着地行走。②造模前及造模后6 h、24 h、36 h、48 h分别测量各大鼠右侧踝关节周径1次，于踝关节最突起处（造模前）或肿胀最高处（造模后）用细棉线松紧适度绕3周，取其平均值。所有测量工作由同一个人完成，并于同一位置处测量。③造模48 h后处死动物，腹主动脉取血，检测血常规和血肌酐、血尿酸。
2.3 统计学方法 各指标计量数据计算及其95 % CI，组内治疗前后差异采用配对t检验；等级资料采用多维度频率分布表分析；组间比较采用两组独立样本的非参数检验。
3 结 果
3.1 一般情况 除F组大鼠死亡2只（可能与吲哚美辛的胃肠道副作用有关）外，余无异常。
3.2 药物对大鼠关节局部的影响 各组大鼠均于造模后出现关节部位皮肤充血，触之皮温升高，继之出现关节软组织肿胀，随着时间的延长，关节肿胀度逐渐减轻，皮肤逐渐出现皱褶。
3.3 药物对踝关节周径的影响 结果如表1所示，A组以造模后24 h踝关节肿胀最为严重；B、C、D、E组以造模后6 h踝关节肿胀最为严重，说明药物能减轻该模型的关节肿胀度；C组优于B组，C组与D组、E组疗效无明显差异（P<0.05），F组疗效优于C组、D组与E组。
3.4 药物对步态的影响 结果如表2所示，B、C、D、F组均能减轻大鼠的急性关节炎症，改善其步态。
3.5 药物对白细胞的影响 结果如表3所示，各组对白细胞均数的影响无显著差异（P>0.05）。但A、B、D、F组均出现不同程度的白细胞减少，而C、E组未出现，各组比较有统计学差异（P<0.05）。
3.6 药物对肾功能的影响 结果如表4所示，C组降血尿酸作用优于B、D组，与E组相当，优于F组；A组与F组血尿酸比较，差异无统计学意义（P>0.05）；各组对血肌酐均无明显影响。
3.7 药物对大鼠精神状态的影响 观察到仅F组大鼠精神差，不喜运动，与造模前差别较大，余各组大鼠精神状况良好，与造模前相似。 3.8 药物对关节病理变化的影响 正常关节组织，表面覆以滑膜组织，内衬滑膜细胞，下为疏松结缔组织，间有小血管及脂肪组织；A组可见滑膜下层大量中性粒细胞及淋巴细胞浸润；D组可见滑膜细胞不同程度增生，滑膜下层黏液样变性，间质中性粒细胞减少甚至消失，散在淋巴细胞及浆细胞浸润。
3 讨 论
萆苓痛风方源于李景良教授的经验方，对湿热阻络型急性痛风性关节炎疗效明显。李景良教授认为湿热阻络型急性痛风性关节炎病变主要发于下肢，且反复发作难愈，病变特点符合“湿邪”致病特点。根据“湿性趋下”“湿盛则肿”“热盛则痛”等理论研制而成。
萆苓痛风方是由《成方便读》的四妙散加味而成，方中苍术燥湿清热健脾；黄柏清热燥湿；牛膝补肝肾、强筋骨、活血祛瘀、引血下行；薏苡仁祛湿热、利经络；四味合用，为清热利湿之妙剂，外加川萆薢性味淡薄，长于渗湿，分清浊利尿而不伤肾；土茯苓清热解毒、除湿邪利关节；山慈菇清热解毒、消痈散结；赤芍清热凉血、散肿止痛；泽兰与防己以活血化瘀、利水消肿，白芍柔肝止痛等，上方共奏清热解毒、祛湿通络、消肿止痛之功。另外，现代药理学研究表明，土茯苓具有利尿、抗炎镇痛作用[1]；泽泻具有利尿[2]、抗结石形成作用[3]；川萆薢有促进尿酸排泄而降尿酸作用[4，5]；牛膝总皂苷有明显的抗炎镇痛作用[6]；白芍中含有的白芍总苷成分对多种炎症性病理模型如大鼠佐剂性关节炎、角叉菜胶诱导的大鼠足爪肿胀和环磷酰胺诱导的细胞和体液免疫增高或降低模型等具有明显的抗炎、镇痛和免疫调节作用等。
实验结果表明，中药萆苓痛风方对大鼠急性痛风性关节炎具有抗炎镇痛、降血清中尿酸含量的作用；A、B、D、F组均出现不同程度的白细胞减少，C、E组未出现，各组比较有统计学差异（P<0.05），分析原因可能与别嘌醇的用量偏小有关，这说明小剂量的别嘌醇片对白细胞的影响较小；也可能与吲哚美辛则剂量偏大，吲哚美辛对造血系统有抑制作用，造成白细胞减少；中药萆苓痛风方中剂量组（C组）对造血系统无明显影响，中药萆苓痛风方大剂量组（D组）可能对造血系统有一定的副作用。综合来说，中药萆苓痛风方可用于急性痛风性关节炎的治疗，中药各组以C组为好。正常剂量的萆苓痛风方组（C组）无大剂量组（D组）及别嘌醇组所致的白细胞减少、诱发急性痛风性关节炎加重的风险或急性关节炎迁延不愈的可能等副作用，以及吲哚美辛组等明显的胃肠道副作用。但是，该实验样本量小，加之测量及实验误差，其作用及不良反应尚需进一步扩大研究。
4 参考文献
[1] 孙晓龙，王宽宇，张丹琦，等.土茯苓注射液抗炎、镇痛作用的实验研究[J].中国中医药科技，2004，11（4）：231-232.
[2] 胡萍，李志琴.泽泻在痛风治疗中的应用探讨[J].北京中医，2006，25（5）：294-296.
[3] 尹春萍，刘继红，章咏裳，等.泽泻水提取液预防草酸钙结石形成的体外及动物实验研究[J].同济医科大学学报，1997，26（2）：99-101.
[4] 费洪荣，毛幼桦，朱玮，等.粉萆薢降尿酸作用研究[J].医药导报，2007，26（11）：1270-1272.
[5] 陈光亮，刘海鹏，韩 茹，等.萆薢总皂苷合用牛膝总皂苷降血尿酸和抗炎作用的组方合理性研究[J].中国药理学通报，2007，23（11）：1467-1471.
[6] 周厚明，陈树清，孙保国，等.四黄水蜜外敷合加味四妙散内服治疗急性痛风性关节炎的临床研究[J].中药材，2007，30（9）：1196-1198.
【关键词】 关节炎，急性痛风性；中药治疗；萆苓痛风方；实验研究；动物；大鼠；尿酸
痛风性关节炎是由于长期嘌呤代谢紊乱，血尿酸增高，导致尿酸盐结晶沉积在关节及关节周围组织，造成白细胞趋化而产生的急性炎症反应所致的一种疾病。主要表现为反复发作的关节红、肿、热、痛及痛风石的形成，严重者可导致关节畸形和功能障碍，属于祖国医学痹病、痛风、历节病等范畴。李景良教授运用萆苓痛风方治疗急性痛风性关节炎数10年，疗效较好，为更客观地评价其疗效，笔者进行了本次动物实验研究，现将研究结果总结报告如下。
1 实验材料
1.1 实验动物 健康雄性Wister大鼠70只，体重为303.15±24.464 g，动物许可证号为SCXK鲁2008002，由郑州大学医学院动物实验中心采购提供。
1.2 实验药物 萆苓痛风方浓缩药液由河南大学淮河医院煎药房提供。主要由川萆薢20 g、土茯苓15 g、忍冬藤20 g、炒苍术10 g、薏苡仁30 g、川牛膝15 g、黄柏10 g、金钱草30 g、汉防己10 g、泽兰10 g、赤芍20 g、山慈菇20 g、白芍30 g等组成。吲哚美辛片（山西临汾制药厂生产，批号为010325）。别嘌呤醇片（广州市市桥制药厂生产，批号为011101）。尿酸（中国医药集团上海化学试剂公司进口分装，批号为0001210）。尿酸钠溶液参照Coderre氏等的方法制备，由河南大学淮河医院免疫室提供。
2 方 法
2.1 动物分组与造模方法 将70只雄性健康Wister大鼠随机分为模型组（A组）、萆苓痛风方低剂量组（B组）、萆苓痛风方中剂量组（C组）、萆苓痛风方高剂量组（D组）、别嘌呤醇组（E组）、吲哚美辛组（F组）、空白对照组（G组）7组，每组10只。A、G组每次灌服灭菌注射用水10 ml·kg-1，B、C、D组每次分别灌服浓度比例为1/4∶1∶4的萆苓痛风方浓缩药液10 ml·kg-1，E组每次灌服别嘌呤醇药液10.4 mg·kg-1，F组每次灌服吲哚美辛溶液7.8 mg·kg-1，各组均为每天1次，连用5天。并于第3天第1次用药后1 h将尿酸钠溶液0.2 ml注入到前6组大鼠右侧踝关节腔内。7组均自由饮食与饮水，不控制其入水量。
2.2 观察指标与观察方法 ①对造模后的急性痛风性关节炎模型鼠继续喂药，48 h后观察其步态变化。步态分级按Coerre介绍的方法进行，0级正常行走；I级为轻微跛行，受试下肢略有弯曲；Ⅱ级为中度跛行，受试下肢只能触及地面而不能受力；Ⅲ级为重度跛行，受试下肢弯曲离开地面，三足着地行走。②造模前及造模后6 h、24 h、36 h、48 h分别测量各大鼠右侧踝关节周径1次，于踝关节最突起处（造模前）或肿胀最高处（造模后）用细棉线松紧适度绕3周，取其平均值。所有测量工作由同一个人完成，并于同一位置处测量。③造模48 h后处死动物，腹主动脉取血，检测血常规和血肌酐、血尿酸。
2.3 统计学方法 各指标计量数据计算及其95 % CI，组内治疗前后差异采用配对t检验；等级资料采用多维度频率分布表分析；组间比较采用两组独立样本的非参数检验。
3 结 果
3.1 一般情况 除F组大鼠死亡2只（可能与吲哚美辛的胃肠道副作用有关）外，余无异常。
3.2 药物对大鼠关节局部的影响 各组大鼠均于造模后出现关节部位皮肤充血，触之皮温升高，继之出现关节软组织肿胀，随着时间的延长，关节肿胀度逐渐减轻，皮肤逐渐出现皱褶。
3.3 药物对踝关节周径的影响 结果如表1所示，A组以造模后24 h踝关节肿胀最为严重；B、C、D、E组以造模后6 h踝关节肿胀最为严重，说明药物能减轻该模型的关节肿胀度；C组优于B组，C组与D组、E组疗效无明显差异（P<0.05），F组疗效优于C组、D组与E组。
3.4 药物对步态的影响 结果如表2所示，B、C、D、F组均能减轻大鼠的急性关节炎症，改善其步态。
3.5 药物对白细胞的影响 结果如表3所示，各组对白细胞均数的影响无显著差异（P>0.05）。但A、B、D、F组均出现不同程度的白细胞减少，而C、E组未出现，各组比较有统计学差异（P<0.05）。
3.6 药物对肾功能的影响 结果如表4所示，C组降血尿酸作用优于B、D组，与E组相当，优于F组；A组与F组血尿酸比较，差异无统计学意义（P>0.05）；各组对血肌酐均无明显影响。
3.7 药物对大鼠精神状态的影响 观察到仅F组大鼠精神差，不喜运动，与造模前差别较大，余各组大鼠精神状况良好，与造模前相似。 3.8 药物对关节病理变化的影响 正常关节组织，表面覆以滑膜组织，内衬滑膜细胞，下为疏松结缔组织，间有小血管及脂肪组织；A组可见滑膜下层大量中性粒细胞及淋巴细胞浸润；D组可见滑膜细胞不同程度增生，滑膜下层黏液样变性，间质中性粒细胞减少甚至消失，散在淋巴细胞及浆细胞浸润。
3 讨 论
萆苓痛风方源于李景良教授的经验方，对湿热阻络型急性痛风性关节炎疗效明显。李景良教授认为湿热阻络型急性痛风性关节炎病变主要发于下肢，且反复发作难愈，病变特点符合“湿邪”致病特点。根据“湿性趋下”“湿盛则肿”“热盛则痛”等理论研制而成。
萆苓痛风方是由《成方便读》的四妙散加味而成，方中苍术燥湿清热健脾；黄柏清热燥湿；牛膝补肝肾、强筋骨、活血祛瘀、引血下行；薏苡仁祛湿热、利经络；四味合用，为清热利湿之妙剂，外加川萆薢性味淡薄，长于渗湿，分清浊利尿而不伤肾；土茯苓清热解毒、除湿邪利关节；山慈菇清热解毒、消痈散结；赤芍清热凉血、散肿止痛；泽兰与防己以活血化瘀、利水消肿，白芍柔肝止痛等，上方共奏清热解毒、祛湿通络、消肿止痛之功。另外，现代药理学研究表明，土茯苓具有利尿、抗炎镇痛作用[1]；泽泻具有利尿[2]、抗结石形成作用[3]；川萆薢有促进尿酸排泄而降尿酸作用[4，5]；牛膝总皂苷有明显的抗炎镇痛作用[6]；白芍中含有的白芍总苷成分对多种炎症性病理模型如大鼠佐剂性关节炎、角叉菜胶诱导的大鼠足爪肿胀和环磷酰胺诱导的细胞和体液免疫增高或降低模型等具有明显的抗炎、镇痛和免疫调节作用等。
实验结果表明，中药萆苓痛风方对大鼠急性痛风性关节炎具有抗炎镇痛、降血清中尿酸含量的作用；A、B、D、F组均出现不同程度的白细胞减少，C、E组未出现，各组比较有统计学差异（P<0.05），分析原因可能与别嘌醇的用量偏小有关，这说明小剂量的别嘌醇片对白细胞的影响较小；也可能与吲哚美辛则剂量偏大，吲哚美辛对造血系统有抑制作用，造成白细胞减少；中药萆苓痛风方中剂量组（C组）对造血系统无明显影响，中药萆苓痛风方大剂量组（D组）可能对造血系统有一定的副作用。综合来说，中药萆苓痛风方可用于急性痛风性关节炎的治疗，中药各组以C组为好。正常剂量的萆苓痛风方组（C组）无大剂量组（D组）及别嘌醇组所致的白细胞减少、诱发急性痛风性关节炎加重的风险或急性关节炎迁延不愈的可能等副作用，以及吲哚美辛组等明显的胃肠道副作用。但是，该实验样本量小，加之测量及实验误差，其作用及不良反应尚需进一步扩大研究。
4 参考文献
[1] 孙晓龙，王宽宇，张丹琦，等.土茯苓注射液抗炎、镇痛作用的实验研究[J].中国中医药科技，2004，11（4）：231-232.
[2] 胡萍，李志琴.泽泻在痛风治疗中的应用探讨[J].北京中医，2006，25（5）：294-296.
[3] 尹春萍，刘继红，章咏裳，等.泽泻水提取液预防草酸钙结石形成的体外及动物实验研究[J].同济医科大学学报，1997，26（2）：99-101.
[4] 费洪荣，毛幼桦，朱玮，等.粉萆薢降尿酸作用研究[J].医药导报，2007，26（11）：1270-1272.
[5] 陈光亮，刘海鹏，韩 茹，等.萆薢总皂苷合用牛膝总皂苷降血尿酸和抗炎作用的组方合理性研究[J].中国药理学通报，2007，23（11）：1467-1471.
[6] 周厚明，陈树清，孙保国，等.四黄水蜜外敷合加味四妙散内服治疗急性痛风性关节炎的临床研究[J].中药材，2007，30（9）：1196-1198.