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目的
探讨EIF2B3突变的少突胶质细胞是否存在对内质网应激(ERS)的不耐受，检测未折叠蛋白反应(UPR)通路的变化，为了解白质消融性白质脑病(VWM)的发病机制提供线索。
方法本研究利用转染EIF2B3野生型或突变型c.1037T>C全长cDNA慢病毒载体的人类少突胶质细胞系，Thapsigargin对其进行ERS诱导后，通过细胞增殖－毒性检测试剂盒实验反映细胞增殖活力，检测凋亡相关分子Caspase－3剪切体的表达反映细胞凋亡水平，来验证野生与突变细胞对ERS的耐受性，并比较二者在基础状态及ERS诱导后不同时间点UPR激酶样内质网激酶(UPR－PERK)通路各分子指标的变化。
结果1.EIF2B3突变型少突胶质细胞对ERS不耐受，表现为ERS刺激后凋亡的增加和活力的显著下降。2.EIF2B3突变型少突胶质细胞存在UPR通路的过度激活。3.基础状态下UPR－PERK通路分子磷酸化α亚基的真核翻译起始因子2(P－eIF2α)、激活转录因子4、CCAAT增强子结合蛋白(CHOP)和生长抑制DNA损伤基因34(GADD34)的水平不同程度高于野生组。4.ERS刺激24 h后，凋亡相关的UPR分子(CHOP和GADD34)和抑制蛋白翻译的P－eIF2α在野生型细胞中表达下降，而在突变细胞中持续高表达。
结论EIF2B3突变的人少突胶质细胞对ERS不耐受，这种不耐受与突变细胞存在UPR－PERK通路的过度持续激活，引起凋亡性的细胞死亡相关。减轻突变细胞的内质网负荷或稳定UPR的过度激活有望对疾病进展起到干预作用。