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目的:获取抗A-CD14单克隆抗体(单抗)ZCH-7—2F9(简称2F9)轻链可变区(VL)和重链可变区(VH)基因,为2F9单链抗体(ScFv2F9)的构建奠定基础。方法:复苏2F9和NS-1细胞株,并亚克隆2F9细胞株,从其最佳克隆93A10提取总RNA,RQ1 RNase—Free DNase处理污染的DNA,与NS—1细胞进行同步对照,通过RT—PCR,扩增获得2F9单抗VL基因和VH基因,分别克隆入pGEM-T Easy载体,然后转化DH5a细菌,酶切鉴定并纯化阳性重组子,测序后进行在线核苷酸序