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目的构建人中期因子（MDK）基因重组逆转录病毒载体，转染人胃癌SGC7901细胞株，为探讨MDK的生物学功能奠定基础。方法扩增人MDK编码序列基因片段，经限制性内切酶酶切后将目的片段插入pLXSN逆转录病毒载体。经酶切及测序鉴定后与pVSVG共转染GP293包装细胞，收集病毒上清感染人胃癌SGC7901细胞，G418筛选获得阳性细胞株。结果酶切及DNA测序证实MDK基因重组逆转录病毒载体构建正确。病毒上清感染SGC7901细胞，G418筛选出阳性克隆，经实时定量PCR及Western blot检测发现SG